1. 研究目的与意义
背景:
淀粉酶是水解淀粉和糖原酶类的总称,广泛存在于动植物和微生物中。也是最早实现工业生产并且迄今为止用途最广,产量最大的酶制剂品种。人类对淀粉酶的应用开始于几千年前,但是酶提取出来使用是从十九世纪开始的。1833年,payer从麦芽提取液中加酒精沉淀获得淀粉酶,1896年日本人高峰让吉用麸皮培养米曲霉,用水提取再以酒精沉淀得到淀粉酶作为消化剂,并在美国设厂从事微生物酶的生产和研究。1920年左右,法国人biodin和effront等又先后发现枯草杆菌可以分泌耐热并且活性更高的a一淀粉酶,于1926年在德国设厂生产,为微生物酶的工业生产奠定了基础。在工业高度发达的今天,淀粉酶占据了工业化酶制剂市场约25%的市场份额。
目的、意义:
2. 研究内容和预期目标
淀粉酶,是指能水解淀粉、糖原和有关多糖中的o-葡萄糖键的酶。
一般作用于可溶性淀粉、直链淀粉、糖元等α-1,4-葡聚糖,水解α-1,4-糖苷键的酶。
广泛存在于动植物和微生物中,是最早实现工业生成,迄今为止用途最广、产量最大的酶制剂品种。
3. 研究的方法与步骤
方法:
初筛: 从某淀粉厂附近采集土样, 称取5 g土样, 放入装有 45 ml无菌水的三角瓶中, 震荡 20 m in后静置 5 m in, 然后进行浓度梯度稀释到10^- 6, 分别在 10^- 4、10^- 5、10^- 6 浓度下各取1 ml土壤稀释液制成混菌平板, 将培养皿放入37℃培养箱中培养 24 h. 取出培养好的平皿, 在长出的菌落上滴加碘液, 菌落周围如有无色透明圈出现, 说明淀粉被水解, 即菌株能产生淀粉酶. 挑选有明显透明圈的单菌落, 转接到斜面上,编号保存.
复筛: 从冰箱中取出所有初筛得到的菌株,转接试管斜面活化, 37℃下恒温培养 24 h. 将所有菌种分别点种到分离培养基平板上进行培养,待菌落长成后向菌落上滴加碘液, 比较淀粉水解圈大小, 挑取 d0 /d1 ( d0 为水解圈直径, d1 为菌落直径 )较大的菌株连续进行 3次平板点种培养,选取 d0 /d1 值最大的菌株作为本实验出发菌株.
淀粉酶活力的测定
4. 参考文献
1.马向东,马立新,薛征峰,等.一种鉴定α-淀粉酶活性及其产生菌的新方法[j].华中农业大学学报.2000,19(5):456-460.
2.陈波,李大力,杨树林.酸性α-淀粉酶生产菌株的筛选和酶的纯化及酶的性质研究[j].食品科学.2005,26(5):119-122.
3.张丽苹,徐岩.酸性α-淀粉酶产生菌的选育的初步研究[j].工业微生物.2002, 32(4): 11-14.
5. 计划与进度安排
2022.12.24前学生完成选题工作
2022.3.27前完成开题报告
2022.6.17前完成论文答辩
