1. 研究目的与意义
自50 年代末，Bender 等首先对出芽茁霉——一种不完全菌产生的粘多糖普鲁兰(又称茁霉多糖)的结构进行了研究，发现这是一种以α-1 , 6 糖苷键将麦芽三糖头尾相连而形成的多糖。1961 年，Bender 等进一步发现由产气气杆菌所产生的细胞外酶——普鲁兰酶。普鲁兰酶是一类脱支酶，可以将支链淀粉的整个侧枝剪去，从而形成直链淀粉，使得糖化过程加快，并提高水解效率。由于它可以把最小单位的支链分解掉，所以当它与β-淀粉酶共同起作用时，可以对淀粉进行最大限度的利用，从而提高原料的利用效率，因此，它在以淀粉为原料的现代食品加工业，白酒酿造等行业中得到了较好的应用，有着重要用途。在食品领域，通常与淀粉酶结合使用，生产果糖和麦芽糖糖浆。在生物能源方面，以淀粉等生物质资源开发乙醇、丁醇等生物燃料也是当前能源开发的热点，这说明普鲁兰酶具有广泛的工业应用价值。
普鲁兰酶广泛分布于丝状真菌、细菌、酵母、植物和动物中，如芽孢杆菌，厌氧芽孢杆菌，水栖热袍菌，巴伦葛兹类芽孢杆菌。
对普鲁兰酶进行更深入的研究，更好地掌控普鲁兰酶的作用机制以及其最适条件，有助于提高对其的利用，并使其进行更高效的利用，从而获得更高的经济效益。但由于工业用普鲁兰酶的分泌能力较差，产能较低，并且稳定性差及在特殊环境下的活性等局限，用于工业化生产的普鲁兰酶非常有限。
目前，很多研究报道了不同特性的普鲁兰酶，如嗜热栖热菌来源的耐热性达到70 ℃的普鲁兰酶；来源于嗜碱芽孢杆菌的耐受表面活性剂的普鲁兰酶。虽然有不同特性的普鲁兰酶报道，但是特性单一，不能满足对多种特性需求的工业化生产需要，如目前淀粉糖化过程一般在60 ℃高温和pH4.5 的弱酸性条件下进行48～60 h，在此过程中普鲁兰酶不仅要维持高的催化活性还要保持高稳定性，而根据文献，符合这种多元化条件的普鲁兰酶非常有限。
因此本实验着重对一株高产普鲁兰酶进行诱变，以获得更为优秀和稳定的菌株，并对其酶动力学进行分析测定。2. 研究内容和预期目标
（1）一株土壤高产普鲁兰酶产生菌进行诱变
（2）土壤高产普鲁兰酶诱变菌的酶动力学测定
目标：本实验通过对一株土壤高产普鲁兰酶进行诱变，筛选出产量更高，酶活更高，更为稳定的优秀菌株，并对其进行酶动力学测定，为后期对普鲁兰酶的性质及动力学研究奠定基础。3. 研究的方法与步骤
研究方法：
以从土壤中得到的普鲁兰酶为出发菌株，对其进行紫外线诱变处理，再从突变株中进行筛选，以得到产普鲁兰酶活力较高的菌株。
研究步骤：
4. 参考文献
[1] bender h, lehmann j, wallenfels k . pullulan, an extracellular g lucanfrom pullularia pullulans [j]. biochimbiophys acta, 1959, (36): 309-316
[2] bender h, wallenfels k. untersuchungen and pullulan.Ⅱ, spezifischerabbau durch ein bakterielles [j]. enzymbiochem z, 1961, (334):79-95
[3] 高涛, 王芳, 别小妹, 等. 产耐热普鲁兰酶菌株的分离、筛选与鉴定[j]. 食品科学, 2017, (8) : 117-121.
5. 计划与进度安排
1、2022-2022-1学期17-20周～2022-2022-2学期1-2周（2022年12月28日~2022年3月14日），接受任务、查阅和翻译文献，撰写开题报告；
2、第3周~第5周（2022年3月15日～2022年4月4日），完成实验前准备工作，配制各实验所需药品。
3、第6周~第7周（2022年4月5日～2022年4月18日），预实验
