1. 研究目的与意义
l-核糖醇异构酶,它能将醛糖转化为相应的酮糖。因此将l-核糖醇异构酶固定化后连续地生产,对提高产品质量、降低酶的成本就具有较大的优越性。
固定化酶技术是20世纪60年代发展起来的一项生物工程技术,是使生物酶得到广泛而有效利用的重要手段。酶的固定化是用固体材料将酶束缚或限制于一定区域内,进行其特有的催化反应,并可回收及重复利用的技术。与游离酶相比,固定化酶在保持其高效专一及温和的酶催化反应特性的同时,又克服了游离酶的不足之处,呈现储存稳定性高、分离回收容易、可多次重复使用、操作连续可控、工艺简便等优点。常用的固定化酶方法有吸附法、包埋法、交联法。
本实验旨在通过对l-核糖醇异构酶固定化方法及条件的研究和优化,从而得出酶的最佳固定化方法和条件。
2. 研究内容和预期目标
l-核糖醇异构酶是一类重要的工业催化剂. 本试验将利用多种方法对l-核糖醇异构酶进行固定化, 包括吸附法, 包埋法和交联法等。
1 完成三种方法对葡萄糖异构酶的固定化.
2 对固定化过程的参数进行优化.
3. 研究的方法与步骤
1 完成三种方法对l-核糖醇异构酶的固定化.
①吸附法:称取1gl-核糖醇异构酶,加入50ml缓冲溶液中,冰浴,搅拌均匀5分钟后,加入2g固定化载体,室温搅拌4小时,过滤得到固定化酶,4oc冰箱保存。
②包埋法:于10ml4%的海藻酸钠溶液中,加入1gl-核糖醇异构酶,搅拌均匀,用注射器注入100ml 0.1m 氯化钙溶液中,搅拌2小时,过滤得到固定化酶,4oc冰箱保存。
4. 参考文献
1 葡萄糖异构酶的固定化及其性质研究 《高等学校化学学报》,1996年 第5期
2 产葡萄糖异构酶细胞的固定化 《食品科学》,2013年第34卷第9期
3 gloria fernandez-lorente,jose m.palomo,zaidacabrera. specificity enhancement towards hydrophobic substrate by immobilization of lipases by interfacial activation on hydrophobic supports. enzyme and microbial technology. 2007 (41):565-569.
5. 计划与进度安排
1 2022 11-2022 12 查阅文献,撰写开题报告和前言
2 2022 12-2022 02 固定化方法优化
3 2022 03-2022 04 固定化酶制备和应用
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