椎体虫中Ribosome蛋白的构建开题报告

 2022-05-24 09:05

1. 研究目的与意义

核糖体蛋白质是指构成核糖体的蛋白质。
核糖体蛋白是组成核糖体的主要成分,在细胞内蛋白质生物合成中发挥重要作用。人们发现,核糖体具有参与dna修复、细胞发育调控和细胞分化等核糖体外功能。并且在胃癌、结直肠癌、食管癌和肝癌等肿瘤组织中一些核糖体蛋白基因高表达,通过对肿瘤组织中核糖体蛋白基因高表达的深入研究,可以进一步阐明肿瘤发生、发展的机制,了解核糖体蛋白基因高表达在恶性肿瘤中的作用,为肿瘤的基因诊断和基因治疗开辟一个新的研究领域。
在真核细胞中发现的核糖体蛋白有80种,广泛分布于各种组织中,它们与核糖核酸共同组成核糖体,在蛋白质的生物合成中起重要作用。越来越多的证据表明:许多种核糖体蛋白除组成核糖体,参与蛋白质的生物合成之外,还具有独立于蛋白质生物合成作用

化学药剂师如今已可以利用细菌与真核生物(如人类)细胞中核糖体结构的差异来提取或合成能抵抗细菌感染而不损伤受感染者自身细胞的抗生素(如氨基糖苷类抗生素、四环素类抗生素等蛋白质合成抑制剂类抗生素),这类抗生素能抑制感染患者的病原体微生物的细胞内的蛋白质合成。基于70s核糖体与80s核糖体结构上的不同,细菌细胞中的70s核糖体较容易受到某些抗生素的损害而真核细胞中的80s核糖体却可以不受影响。虽然一些真核生物的线粒体中也含有类似细菌核糖体的70s核糖体,但线粒体拥有具有一定选择透过性、使这些抗生素不能随意透过的双层磷脂双分子膜,所以这些细胞器也可以避免该类抗生素对其中核糖体的影响

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2. 研究内容和预期目标

试验主要利用蛋白质重组技术将椎体虫核糖体基因插入到氨苄青霉素抗性的质粒中,然后对蛋白质进行体外表达并纯化的过程,因此本试验的内容主要包括一下几个方面:

1,目标基因的扩增,酶切

2,目标基因插入到载体中

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3. 研究的方法与步骤

1.基因组dna的提取

2.引物的设计与合成

3.pcr扩增核糖体基因

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4. 参考文献

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  2. amyjobe,yaserhashem,amedeedes georges,jie fu,sarahn. buss.33high-resolution cryo-em structure of the trypanosoma brucei 80s: a uniqueeukaryotic ribosome《journal of biomolecular structure dynamics》,2013,31(sup1):20-20(1)
  3. sjoseph,slzimmer,cmartin,wnoreen,lkread.ribosomebiogenesisrequires a highly diverged xrn family 5′→3′exoribonuclease for rrna processing intrypanosomabrucei《rna-a publication of the rna society》,2013,19(10):1419-1431
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  8. 李禄琴,梁爱华八肋游仆虫酸性核糖体蛋白p1的基因克隆与表达纯化《特别健康:下》,2014(3):341-341
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5. 计划与进度安排

1,3月2号-3月30号 目标基因的扩增,酶切,插入及检验

2,4月1号-4月15号 目标基因的蛋白表达及检验

3,4月16号-4月30号 目标蛋白的纯化

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