黑曲霉内切菊粉酶在酿酒酵母细胞表面的展示开题报告

1. 研究目的与意义

酿酒酵母是广泛用于食品工业的食品安全级微生物，具有与高等真核生物类似的基因表达调控系统和蛋白质翻译后修饰加工机制，能有效的折叠和表达复杂的真核蛋白，菊粉是由β酒呋喃果糖以β喃果糖以β糖苷键相连，并在其还原端接一个α苷吡喃葡萄糖基的果聚糖。

通过菊粉酶的催化作用，以菊粉为原料，可以生产高果糖浆、低聚果糖、乙醇、丙酮、丁醇或琥珀酸等产品。

若将内切菊粉酶展示在酿酒酵母的表面，而且展示的内切菊粉酶能够具有较高且较稳定的内切菊粉酶活力，那么该酵母菌可以用作制备低聚果糖的生产菌株。

2. 国内外研究现状分析

详见文献综述

3. 研究的基本内容与计划

2015.10～2015.11查资料，根据任务书，撰写开题报告，了解研究内容，对实验涉及仪器、操作方法有一定了解；2015.11～2015.12 基本掌握实验技能，制定一套实验方案，预处理实验，确定各因素及其水平，得出实验最佳条件：2015.12～2016.1 补充实验，撰写论文及论文答辩。

4. 研究创新点

将内切菊粉酶固定在细胞表面作为全细胞催化剂，减少纯化步骤和重复操作。

展示在细胞表面的酶与底物分子更容易接触，反应后易与产物脱离，后续分离简便。

本实验选择酿酒酵母细胞壁蛋白 a 凝集素为锚定蛋白，采用酿酒酵母真核表面展示系统对其进行表面展示，以期获得稳定性得到提高、生产成本相对低廉的全细胞催化剂，为内切菊粉酶工业化生产及应用奠定基础。