双果糖酐产生菌的筛选、纯化与鉴定开题报告

1. 研究目的与意义

通过从菊芋土壤中筛选出能够产生双果糖酐的野生型菌株，进行菌株的纯化与鉴定，获得双果糖酐高产菌株。

研究意义：填补国内功能性甜味剂双果糖酐Ⅲ的研发不足，选育出双果糖酐的高产菌株，推动双果糖酐的工业化生产。

2. 国内外研究现状分析

国内：目前国内双果糖酐仍处于研究阶段，仅江南大学实验室进行了一些研究。江南大学赵萌等人自行筛选了一株金黄节杆菌，可高产菊糖果糖转移酶，该酶酶解菊糖主要产物为双果糖酐III，产物中含少量蔗果三糖、蔗果四糖、蔗果五糖、等低聚果糖，转化率可达75%。

国外：目前国外对双果糖酐III的研究已经比较多，尤其是日本筛选出多株可以产生双果糖酐的菌株，并且日本已经工业化生产双果糖酐Ⅲ。迄今为止，筛选出13中微生物可以产生双果糖酐的菊糖果糖转移酶。日本的学者对菊糖果糖转移酶的酶学性质也做了深入地研究，其pH的稳定范围在5-6之间，温度为40-60oC。

3. 研究的基本内容与计划

双果糖酐产生菌的筛选、纯化与鉴定。建立双果糖酐的分析测定方法。

（1）双果糖酐的分析方法的建立。通过查阅文献资料，总结已有的双果糖酐的分析方法，探索利用高效液相色谱法进行双果糖酐的定性与定量分析，确定双果糖酐最佳的分析测定方法。

（2）双果糖酐产生菌的筛选、纯化。通过查阅文献资料，确定有效的菌种筛选方法，并进一步对菌种进行分离纯化，获得纯种菌株。

4. 研究创新点

从自然界土壤中筛选出产双果糖酐的高产野生型菌株，具有自主知识产权，为以后的工业化生产提供保障与坚实的基础。