1. 研究目的与意义
查尔酮合成酶作为黄酮类化合物生物合成途径中的关键酶,对整个黄酮类次生代谢的调控非常重要。
查尔酮合成酶基因的深入研究会为新型药物的寻找,提升植物本身营养物,催化一系列结构多样的生理生化反应和促进作物的遗传改良等提供新的途径。
本论文将百合和芒果的查尔酮合酶基因在大肠杆菌中进行异源表达并对其酶学性质进行研究,为植物类黄酮化合物的生物合成途径提供更多的了解,以及对植物chs基因研究进行一定补充。
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2. 国内外研究现状分析
国内外在百合的查尔酮合成酶的研究中,虽已经得到百合的chs的基因片段,并进行了转化,但也面临着转化率低,且对百合的chs体外催化性质不清等等问题。
而芒果中黄酮化合物成分特别高,是查尔酮合成酶研究的良好素材。
但到目前为止,还没有相关实验对其查尔酮合成酶的异源表达与体外催化性质进行研究。
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3. 研究的基本内容与计划
研究内容:
1、确定合适的植物来源的查尔酮合成酶;
通过文献查阅,基因序列比对,genbank上基因挖掘等手段,筛选出合适植物来源的查尔酮合成酶用于异源表达。
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4. 研究创新点
在未来生产实践中,还需在以下方面开展进一步的研究工作:(1)开展CHS 基因的克隆、结构特点、表达部位和时空表达模式的研究,以便有目的的用之于转化植物, 使之在转基因植物中大量、持久地表达, 提高目的次生代谢产物的含量, 使植物查尔酮合成酶转基因应用进入产业化具有重要意义。
(2)多途径,多策略协同的方法进行操作有可能突破单基因单途径和单一策略的限制, 提高类黄酮次生代谢基因工程的调控精度。
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