1. 研究目的与意义
黄酮类化合物是一种广泛存在与自然的天然产物,药理学及营养学的研究表明:天然的黄酮类化合物在预防及控制癌症、糖尿病和心血管疾病等现代常见疾病方面具有显著的功效,自21世纪初期开始,黄酮类化合物的分离提取及药理活性的研究成为一大热点,至今已有超过15000种植物来源的天然黄酮类化合被分离坚定。
目前,黄酮类化合物主要可分为8大类:1.黄酮类;2.异黄酮类;3.黄烷酮类;4.黄烷醇类;5.黄酮醇类;6二氢黄酮类;7.异黄烷类;8.查耳酮类。
并且根据已有的文献报道可知,天然的黄酮类化合物绝大部分都是以不同程度糖基化形式存在的,其中包括吡喃葡萄糖苷、半乳糖苷、鼠李糖苷或芸香糖苷等形式。
2. 国内外研究现状分析
1.黄酮类化合物的水解主要有酸水解和酶水解,但国内外主要研究酶水解,因为酶水解条件温和,多采用弱酸性的缓冲溶液,大豆异黄酮苷元不易变性,是工业上制备富含大豆异黄酮苷元的保健食品或药品的十分有前途的途径。
2.β葡萄糖苷酶作为水解大豆异黄酮的酶,目前在国内外研究较多。国内已有人用黑曲酶作为发酵菌种生产β一葡萄糖苷酶,并研究了该酶的酶学性质,优化了产酶发酵条件,并把生产的β一萄莓糖苷酶应用于果酒的增香。国内大豆异黄酮耱糖苷的β一葡萄糖苷酶水解研究尚未见报道。
3.90年代后,国外对大豆异黄酮的研究异常活跃,无论是各种大豆品种和各种大豆食品中大豆异黄酮的含量测定,还是各种大豆异黄酮的生理活性研究都己达到一定深度。目前我国也已有大豆异黄酮保健食品上市。
3. 研究的基本内容与计划
研究内容: 1.优化培养条件并高效表达五种不同来源的β-葡萄糖苷酶。
2. 对几种不同来源的β-葡萄糖苷酶酶学性质及其对黄酮糖苷的催化能力进行比较,包括反应ph、反应时间、反应温度、底物浓度、酶用量等参数。
3.分析不同嗜热菌来源的 β-葡萄糖苷酶的催化转一性及初步探索催化机理。
4. 研究创新点
筛选五种嗜热菌来源的β-葡萄糖苷酶,特异性的转化黄酮苷类化合物生成黄酮苷元,此次实验比以往实验中所用的酶的种类更多,同时,除了研究这几种不同来源的酶的酶学性质和比较这几种酶对黄酮糖苷的催化能力,还对这几种不同来源的β-葡萄糖苷酶的催化转一性进行系统分析,并要对催化机理进行初步探索归纳总结,从而得到黄酮苷类的水解酶库。
