1. 研究目的与意义
1)目的及意义 碱性纤维素酶在洗涤业、废水处理、制浆造纸以及中药活性成分的酶法制备等领域都具有良好的开发利用前景。
本实验室前期从土壤中分离得到一株产碱性纤维素酶能力良好的细菌。
本课题将进一步明确该菌株的分类学地位、产酶条件及酶学特性，评价其实际应用价值。
2. 国内外研究现状分析
纤维素类物质占植物干重的50%,是地球上分布最广、含量最丰富的碳源物质。
微生物对纤维素的降解转化是自然界中碳素循环的主要环节,因此研究微生物对纤维的降解具有重要意义,其中丝状真菌是研究最多的纤维素降解类群[1,2],其产生的纤维素酶一般在酸性或中性偏酸性条件下水解。
3. 研究的基本内容与计划
1.叙述微生物产纤维素酶的研究概况文献查阅及资料收集：1周重点介绍碱性纤维素酶的特性、重要价值、产生菌株及碱性纤维素酶产生菌的筛选方法等：2~5周 2. 分析细菌来源的碱性纤维素酶研究中存在的问题，以及解决的可行途径：6~12周 3、论文撰写：13~14周
4. 研究创新点
分离堆肥中具有产纤维素酶酶活的菌株并进行鉴定,同时进行该菌株纤维素酶酶特性的研究。
方法:采用刚果红平板法进行筛选得到菌株,利用16srdna通用引物对其基因组dna进行扩增,测序得到gch-1的部分16srdna序列,经blastn调出与菌株16srdna同源的序列,用软件mega 4.0按照neighbor-joining方法构建16srdna系统发育树,并采用dns法测定所产纤维素酶酶活。
结果:gch-1的生理生化指标与蜡质芽胞杆菌理化指标相符,与bacillus cereusiam 12605(t)处于同一分支,相似性为99.8%.gch-1菌株发酵48h能达到最大产酶量,所产纤维素酶在40℃有最高酶活力,酶活力分别为0.581u/ml,gch-1菌株产生的纤维素酶酶系在ph 7.0~9.0能够保持较高的相对酶活力,超过85%相对活力。
