链球菌蛋白L的菌种筛选及表达条件鉴定开题报告

1. 研究目的与意义

目的：本课题主要对链球菌蛋白l进行表达的条件优化，结合相关文献，简要阐述其应用意义：蛋白质l是厌氧性细菌大消化链球菌（peptostreptococcus magnus）的一种细胞壁成分，是一种能和广泛的免疫球蛋白相结合的蛋白质，现在经过基因重组技术表达获得，该蛋白只与抗体的k链结合而不会影响抗体的抗原结合位点，这一特性使其与蛋白a或蛋白g相比，能更广泛地结合各种来源及亚类的抗体，包括人、小鼠、大鼠、兔和鸡，但是它并不结合牛、山羊或绵羊来源的免疫球蛋白。

目前蛋白质l被应用于亲和层析中以用于特异性吸附并分离抗体，随着基因工程技术的兴起，也有人采用基因工程或诱变的方法得到protein l，但由于产量不高且纯化较难，其造价仍然很高。

因此，如何获得高表达且纯度较高的protein l，是目前需要改善优化的一个问题。

2. 国内外研究现状分析

国内用于单克隆抗体纯化的免疫亲和层析填料多使用蛋白a或蛋白g，能够更广泛地结合更多种类来源抗体的链球菌蛋白l的研究，还多数集中于研究其结合位点及作用方式。

随着基因工程技术的迅猛发展，人们越来越多地通过蛋白质的异源表达生产蛋白多肽产品。

而对于构建的工程菌株如e.coli能否表达链球菌蛋白l，最优表达条件等研究较少。

3. 研究的基本内容与计划

内容：1、链球菌蛋白L的研究现状及使用前景； 2、筛选出高通量工程菌株； 3、通过多种条件尝试找出最适细胞裂解条件； 4、通过多因素研究找出最优表达条件； 计划：2013年3月初，搜集、查阅资料； 20131年3月中下旬，完成开题报告和文献综述； 2012年3月下旬-4月上旬，完成实验设计； 2012年4月-5月，完成实验、分析实验数据，完成论文初稿，通过中期检查； 2012年5月，修改论文，完成终稿，准备答辩

4. 研究创新点

通过多因素实验进行正交试验设计以确定最优表达条件