1. 研究目的与意义
研究目的：漆酶是一种含铜的多酚氧化酶，能够催化多酚、木质素、氨基苯酚、芳基二胺等物质的氧化。漆酶酶活的测定作为漆酶研究的重要环节，酶活大小是评定筛选高产漆酶菌株的基础。
研究意义：漆酶广泛分布于真菌、高等植物、动物以及部分细菌中，由于漆酶的来源众多，而不同来源的漆酶与底物反应的亲和力是不一样的，所以，至今也没有一种标准的、统一的酶活测定方法。常用测定漆酶酶活的底物有ABTS、紫丁香醛连氮、邻联甲苯胺和愈创木酚。相较其他三种底物，ABTS是目前漆酶测定最常用的底物，在相同条件下，用ABTS测得的漆酶酶活也较其他三种测得的要高。本文从ABTS、愈创木酚及邻联甲苯胺中挑选出ABTS为最终反应底物，研究了温度、底物浓度、缓体体系及其浓度等对变色栓菌漆酶活性的影响，以确定ABTS法测定变色栓菌漆酶酶活的最适条件。
2. 国内外研究现状分析
漆酶是一种含铜的多酚氧化酶，能够催化多酚、木质素、氨基苯酚、芳基二胺等物质的氧化，它催化不同类型底物氧化反应机理主要表现在底物自由基的生成和漆酶分子中四个铜离子的协同作用。 漆酶广泛分布于真菌、高等植物、动物以及部分细菌中，其在生物检测、生物降解、生物染料、纸浆漂白等领域有潜在的应用价值。漆酶酶活的测定作为漆酶研究的重要环节，酶活大小是评定筛选高产漆酶菌株的基础。 目前，常用的漆酶酶活测定方法有分光光度法、高效液相色谱法、极谱法、测O2法、微量热法、脉冲激光光声分析法等。其中，分光光度法因为操作简单、快捷等特点，被广泛使用。由于的来源众多，而不同来源的漆酶与底物反应的亲和力是不一样的，所以，至今也没有一种标准的、统一的酶活测定方法。常用测定漆酶酶活的底物有ABTS、紫丁香醛连氮、邻联甲苯胺和愈创木酚。相较其他三种底物，ABTS是目前漆酶测定最常用的底物，在相同条件下，用ABTS测得的漆酶酶活也较其他三种测得的要高。 |
3. 研究的基本内容与计划
研究内容：
1、漆酶底物专一性的研究
2、漆酶最适反应体系的研究
4. 研究创新点
1. 系统地研究所克隆漆酶基因所表达的重组漆酶的酶学性质为其实际应用奠定基础。
2. 探索漆酶酶活测定的最适反应体系。
