漆酶基因syn-lcc2诱导表达条件的优化开题报告

1. 研究目的与意义

目前，国内外大量的研究工作都是围绕漆酶高产菌株的筛选及其发酵条件的优化展开的。研究成果表明，已有多株漆酶的高产菌株被成功筛选到，并获得了较适宜的培养方式和最佳生理培养条件。但是存在的问题是：高产菌株培养产出的漆酶活力仍然很低，满足不了工业化生产的要求。要实现漆酶工业化生产，就必须解决这个问题。

本论文以Pichia pastris GSII5为菌种，研究液态发酵漆酶的适宜条件，重点研究甲醇添加量、甲醇添加时间、铜离子添加量、温度以及pH调控对重组毕赤酵母产漆酶的影响，并获得适宜的提高漆酶酶活的条件。

2. 国内外研究现状分析

首先，在工业应用方面，目前国内外研究的主要思路集中在通过基因工程这一手段解决两个问题：一是漆酶在天然材料中表达水平较低，难以大量生产及生产成本过高；二是天然漆酶的一些性质不能完全适合造纸工业及废水处理等方面的要求，如：温度、最适ph等。

利用基因工程的手段构建基因重组菌有望使这些性质得到改善。

漆酶的结构是其发挥功能所依赖的基础，它的许多性质和功能不仅要在表达水平及一级结构序列的差异上予以解释，而且还必须从空间结构及其动态变化给予阐明，游离酶的保存条件较为苛刻，经济上不合算等一系列问题。

3. 研究的基本内容与计划

研究内容：

1. sys-lcc1基因分别在km71和gs115中的表达与筛选；

2. sys-lcc1优化表达条件：利用响应面的方法，分别对甲醇添加量，铜离子添加量，ph这三个条件进行优化。

4. 研究创新点

1. 通过表达条件的优化提高漆酶基因的表达水平；