UDP-葡萄糖脱氢酶基因克隆、表达与纯化开题报告

1. 研究目的与意义（文献综述包含参考文献）

1.udp-葡萄糖脱氢酶

udp-葡萄糖脱氢酶（udp-glcdh）是透明质酸合成过程中关键的限速酶，可以将udp-葡萄糖催化生成透明质酸必需的前体物质udp-葡萄糖醛酸。分别采用大肠杆菌bl21（de3）和yk537 的基因组dna 为模板，通过pcr 获得bl21（de3）和yk537 的udp-glcdh 基因ugd，并采用分子生物学方法分别将两种菌株的ugd 基因插入含有pl 启动子的pblmvl2 载体中，分别获得重组质粒pblbugd 和pblyugd，再分别转化于大肠杆菌bl21（de3）和yk537 中，获得4 株重组菌；采用升温诱导表达udp-glcdh，并测定不同重组菌株的udp-glcdh 的活性，探索出不同温度诱导条件下udp-glcdh 的表达量及活性差异。

1.1葡萄糖脱氢酶的酶学研究

2. 研究的基本内容、问题解决措施及方案

研究目的：

udp-葡萄糖脱氢酶（udp-glcdh）是透明质酸合成过程中关键的限速酶，可以将udp-葡萄糖催化生成透明质酸必需的前体物质udp-葡萄糖醛酸。分别采用大肠杆菌bl21（de3）和yk537 的基因组dna 为模板，通过pcr 获得bl21（de3）和yk537 的udp-glcdh 基因ugd，并采用分子生物学方法分别将两种菌株的ugd 基因插入含有pl 启动子的pblmvl2 载体中，分别获得重组质粒pblbugd 和pblyugd，再分别转化于大肠杆菌bl21（de3）和yk537 中，获得4 株重组菌；采用升温诱导表达udp-glcdh，并测定不同重组菌株的udp-glcdh 的活性，探索出不同温度诱导条件下udp-glcdh 的表达量及活性差异。

研究手段：