酿酒酵母组成型表达UGT76G1及其催化合成莱鲍迪甙 A 的研究开题报告

 2021-08-14 18:36:29

1. 研究目的与意义(文献综述包含参考文献)

文 献 综 述1 前言:甜菊糖是从菊科草本植物甜叶菊叶中提取的新型天然甜味剂。

它是一种发展前景广阔的健康新糖源,具有高甜度(为蔗糖的250~300倍)、低热量(仅为蔗糖的1/300)的特性,无毒副作用,无致癌物,食用安全,对高血压、糖尿病、肥胖症、心脏病、龋齿等病症还有一定的药理作用和辅助疗效,是理想的蔗糖替代品。

莱鲍迪甙a是一种无毒、安全、低热能、高甜度的天然甜味剂,口味纯正,没有后苦味。

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2. 研究的基本内容、问题解决措施及方案

1 研究与待解决问题:1.1 将udp糖基转移酶ugt76g1基因插入酿酒酵母组成型载pescd中,成功构建了pescd-ugt-ugt重组质粒。

重组质粒转化入大肠杆菌dh5α中并筛选出阳性克隆后,将其导入表达宿主酿酒酵母,构建表达ugt76g1的重组酿酒酵母yph499(pescd-ugt-ugt)。

利用重组菌粗酶液,考察ugt76g1单酶与双酶的表达量及在催化st甙反应过程中的活性差异。

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