1. 研究目的与意义(文献综述包含参考文献)
文 献 综 述1. 蔗糖磷酸化酶1.1 蔗糖磷酸化酶的性质与结构蔗糖磷酸化酶(sucrose phosphorylase, spase, ec2.4.1.7), 可逆地催化蔗糖磷酸化,生成α-d葡萄糖-1-磷酸脂(g-l-p)和d-果糖.该酶是一种葡糖基转移酶, 能转移蔗糖葡糖基和g-l-p以及包括d-果糖在内的一些糖[1-4]。
蔗糖磷酸化酶属于gh13家族,是一种催化转移葡萄糖基的特异性酶[5]。
主要催化反应类型有两种:(1)将1-磷酸葡萄糖中的葡萄糖基转移至相应受体;(2)将蔗糖水解并可转移葡萄糖基至相应受体,受体可以为水、无机磷酸、含酚羟基和醇羟基等物质[6]。
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2. 研究的基本内容、问题解决措施及方案
2.1本课题研究的主要内容(1)配置培养基,导入大肠杆菌并培养一定时间后,通过测定酶活及酶学性质相关表征,测定蔗糖磷酸化酶在大肠杆菌bl21体内的表达能力。
(2)初步推断出对酶表达影响最大的因素。
(3)通过亲和层析对粗酶夜进行纯化实验。
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