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1. 研究目的与意义、国内外研究现状(文献综述)
研究意义
研究表明,在食品加工过程中,l-天冬酰胺是丙烯酰胺形成的重要前体物质。在食品热加工过程中,l-天冬酰胺与还原糖经历了被称为美拉德反应的非酶促反应过程,生成了丙烯酰胺[1,2]。而美拉德反应能够为热加工食品提供合宜的风味和色泽。在热加工的谷物和薯类食品中含有大量的丙烯酰胺(30-5600ng/g)[3-5],如何降低热加工食品中丙烯酰胺的生成量成为食品加工领域的研究重点。
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2. 研究的基本内容和问题
研究目标
通过理性设计对地衣芽孢杆菌l-天冬酰胺酶Ⅰ型底物特异性进行分子改造,以期获得底物特异性显著提高的突变体。
研究内容
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3. 研究的方法与方案
研究方法
1. 确定影响地衣芽孢杆菌l-天冬酰胺酶Ⅰ型底物特异性的关键位点和关键氨基酸
2. 对关键位点和关键氨基酸进行定点突变以期获得底物特异性显著提高的突变体
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4. 研究创新点
1. 1.目前并没有对地衣芽孢杆菌l-天冬酰胺酶Ⅰ型的底物特异性进行研究
2. 2.地衣芽孢杆菌l-天冬酰胺酶Ⅰ型包括l-天冬酰胺酶和d-天冬酰胺酶两种酶的活性,l-天冬酰胺和d-天冬酰胺属于手性分子,目前在l-天冬酰胺酶的分子改造中对手性分子的研究几乎没有。
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5. 研究计划与进展
2019.1.10-2019.3.10 在实验室学习实验相关操作及试验方法
2019.3.10-2019.3.20阅读相关文献,对定点突变的技术手段及设计突变位点的方法进行学习讨论;
2019.3.20-2019.4.1设计突变位点及引物;
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