磷脂酶D的固定化及其性质研究开题报告

 2021-08-08 12:08

1. 研究目的与意义

磷脂酰丝氨酸(PS)由于具有提高认知力、抗抑郁、缓解紧张压抑和改善老年痴呆症等功能在食品、化妆品和制药行业的应用受到广泛关注。

虽然其在自然界中来源广泛,但是由于在植物中含量较低和动物细胞来源的不安全性,所以目前最安全高效的方法是利用磷脂酶D催化磷脂酰转移制备PS。

采用游离酶反应结束后不容易回收重复利用,因此,研究PLD的固定化,并将其应用于催化PS的合成,实现循环利用,从而达到降低成本的目的。

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2. 国内外研究现状分析

早在1947年Hanahan学者就在胡萝卜中发现了PLD。

现在已经成功的从卷心菜、花生、海藻、拟南芥、大肠杆菌、链霉菌、棒状杆菌中发现了PLD。

相比之下,来自于链霉菌细胞的PLD具有广泛地底物专一性和比较高的转磷脂酰活性,目前已经获得了Streptomyces. PMF、S. halstedii和S. cinnamoneus等链霉菌PLD的完整序列,并成功的在大肠杆菌、酵母和枯草芽孢杆菌等宿主中进行了异源表达。

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3. 研究的基本内容与计划

通过物理吸附法、离子键结合法、共价结合法、包埋法、交联法等单一或者组合的固定化方法,实现PLD的固定化,提高PLD的稳定性,易于回收利用,增加PLD在生产中重复使用的次数。

2019年1月13日前:开题;2019年3月前:PLD固定化方法的确立;2019年4月前:PLD固定化酶的性质研究;2019年5月前:PLD固定化酶的重复使用研究;

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4. 研究创新点

尝试采用磁性载体进行吸附聚层交联的方法法固定PLD,实现PLD酶的易回收和增加循环利用次数,从而达到降低生产成本的目的。

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