1. 研究目的与意义、国内外研究现状(文献综述)
磷脂在自然界分布广泛,几乎所有的细胞中都含有磷脂,它是生物膜的基本组成成分,并在生命过程中起代谢作用和结构形成作用,是重要的生命物质。
磷脂酰胆碱(phosphatidylcholine, pc)俗称卵磷脂,是磷脂酸的衍生物,由甘油与脂肪酸和磷酸胆碱结合而成。
卵磷脂广泛分布于动物、植物和酵母中。
2. 研究的基本内容和问题
磷脂酰胆碱是磷脂的主要成分之一,在自然界中分布广泛,从植物、动物中均可提取。
国内外对粗磷脂中提取磷脂酰胆碱的分离纯化方法有很多,方法主要有:溶剂萃取法、无机盐沉淀法、酶催化精制法、柱层析法和薄层色谱法(tlc)、薄膜分离法、超临界co2萃取法等。
用柱层析和薄层色谱法分离磷脂虽然能得到高纯度的磷脂酰胆碱,但是周期长、制备量少,不适用于工业化生产,可以制备高纯度的标准样品。
3. 研究的方法与方案
研究方法:(1)文献法:查阅大量文献,找出分离纯化磷脂酰胆碱以及测定磷脂酰胆碱含量的适宜方法(2)实验法:通过改变单因素,进行实验,从得到的实验数据中分析得出实验结论技术路线:化学法进行分离纯化实验紫外分光光度计测定磷脂酰胆碱含量正交试验柱层析法制备高纯度标准样实验方案:(1)标准曲线的绘制取0.05g标样用正己烷定容至50ml,分别取1ml、2ml、3ml、4ml、5ml置于25ml容量瓶,加1ml 0.5%的碘-正己烷溶液,静置10min定容,在292nm的波长下测定吸光度。
以卵磷脂含量浓度为横坐标,吸光值为纵坐标,绘制标准曲线,计算得回归方程。
(2)单因素实验称取10g粉末磷脂,加入95%乙醇100ml,于磁力搅拌器上搅拌30min,抽滤,重复1次,合并滤液,浓缩蒸干(用旋转蒸发仪),计算提取率以及磷脂酰胆碱的含量。
4. 研究创新点
特色和创新之处在于,此次实验主要应用于生产,拟解决生产问题,提高磷脂酰胆碱的工业化产量和纯度。
采用简单、无害的方法以及试剂解决生产问题。
5. 研究计划与进展
(1)2015.10.0110.30 查阅文献,制定实验方案(2)2015.11.0111.30 单因素实验,研究溶剂、温度、料液比、时间等单因素对磷脂酰胆碱分离纯化效果的影响,得到影响趋势,了解不同因素对分离纯化效果的影响程度(3)2015.12.0112.30 3因素4水平的正交试验,得出纯化工艺影响因素的最优组合(4)2016.02.2603.20 磷脂酰丝氨酸的柱层析法实验,制备高纯度的标准样品(5)2016.03.2104.30 进行数据整理分析,撰写论文以及修改论文
