骨痹颗粒干预骨关节炎骨破坏的机制研究开题报告

1. 研究目的与意义

内容：

一、软骨细胞的培养：采用家兔关节软骨原代细胞作为研究对象，研究骨痹颗粒对软骨细胞的作用及作用机制，采用的方法为：

1.采用il-1β构建骨关节炎软骨细胞模型

2. 文献综述

中医药治疗骨关节炎骨破坏的机制研究进展

芦琪

南京中医药大学 210046

3. 设计方案和技术路线

研究方案：

1、含药血清的制备：取大鼠，分为空白对照组，塞来昔布组，骨痹颗粒高剂量组，骨痹颗粒中剂量组，骨痹颗粒低剂量组，给予相应药物，空白组给予等体积生理盐水。连续给药一周，每日一次。末次给药后1h，各组大鼠颈总动脉取血，离心收获血清后灭活，过滤后-20℃保存备用。

2、软骨细胞的分离培养：取家兔关节分离培养软骨细胞，加入il-1β诱导细胞炎性损伤；分组，设立设立空白对照组，塞来昔布组，模型组，骨痹颗粒高剂量组，骨痹颗粒中剂量组，骨痹颗粒低剂量组6个组别，分别加入不同浓度骨痹颗粒的含药血清培养，用mtt法检测细胞增殖情况；取细胞上清液，检测no、inos水平，elisa法测定mmp-1、mmp-3、timp-1的含量。

4. 工作计划

第一阶段：准备阶段

1. 相关文献检索、仪器调试及试剂订购，准备实验用器材

2. 确定细胞培养方法和检测指标

5. 难点与创新点

治疗骨关节炎的西药常见有胃肠道反应及毒副作用，而中医药由于其多靶点、多途径的特点在骨关节炎治疗具有明显优势。

本实验通过充分考虑骨关节炎骨破坏的各种因素，建立不同的单细胞多细胞模型，从不同角度研究骨痹颗粒对骨关节炎骨破坏的干预机制，同时为其临床合理用药提供理论依据。