1. 研究目的与意义
鞭毛和纤毛是产生流体运动进化上保守的细胞器，并在化学感觉、机器感觉和细胞内信号发挥作用。在复杂的有机体中，纤毛高度分化，这使得它们能够准确地执行各种功能；它保留了连接到机体9 0或9 2微观结构。FOR20（FOPrelated20kDa 蛋白），是正常形成初级纤毛所需的以前未知且高度保守的蛋白。FOR20在PCM1富集的中心粒卫星和中心体发现。FOR20包含促进自我互动和需要它的卫星定位的Lis1同源域。在RPE1细胞抑制POR20的表达降低了纤毛细胞的百分比和纤毛上纤毛细胞的长度。根据PCM1染色，以及置换PCM1从不溶性洗涤剂到洗涤剂可溶部分的结果判断，它还会改变卫星分布。卫星的亚细胞分布是依赖于两个微管的完整性和分子马达的活动。研究结果表明，FOR20可以参与调节PCM1卫星与微管和分子马达的互动作用。因此FOR20在初级纤毛形成中的作用可能域其在调节中心粒卫星的功能相联系。
纤毛广泛分布于人体多种类型细胞表面，是一种复杂结构、功能精细的细胞器，其基本结构包括轴丝和外被的纤毛膜。纤毛在机体各组织器官中发挥着重要的生理功能，其结构和功能异常会导致多种纤毛相关疾病的发生。根据微管的组成以及排列方式不同，哺乳动物的轴丝主要表现为9 2和9 0两种类型。9 2纤毛多具有多种功能，而9 0纤毛则多呈静止状态，主要功能是感知环境中信号变化并协助信号转导至细胞内部。纤毛运动受Ca2 ，胞内PH以及cAMP、cGMP、PKC等激酶依赖性蛋白磷酸化等多因素调控。深入了解纤毛的结构、功能及运动调控机制，对相关疾病的诊疗具有指导意义。
2. 研究内容和预期目标
一、确定研究的外源基因的序列同时对目的基因进行引物设计。
二、对目的基因进行扩增同时确定使用的构建质粒以及插入位点，纯化质粒进行酶切，并对纯化的质粒进行检测及验证。
三、完成质粒构建：将扩增并酶切完的目的基因插到质粒中，完成质粒构建，并将质粒转入到大肠杆菌中进行扩增。
3. 研究的方法与步骤
研究方法：涂平板法培养菌，感受态的制备与转化-氯化钙法，琼脂糖凝胶电泳法，pcr，质粒进行双酶切，质粒转化转化，sds-page检测蛋白，目的蛋白纯化。
实验步骤：
1.细菌的接种与培养
4. 参考文献
【1】单斌，陈瑞，细菌质粒提取方法的研究【j】.昆明医学院学报，2001，22(1):42-44.
【2】马大龙，劳者歌，孙英.高校表达非融合蛋白的大肠杆菌质粒载体的构建【j】.北京大学学报（医学版），1990，2.
【3】蛋白质纯化技术及应用【m】.化学工业出版社，2005.
5. 计划与进度安排
开始：2022年3月1日
1、第1-2周：查阅文献，设计方案
2、第3周：实验前期准备
