1. 研究目的与意义
生姜为多年生草本植物姜(zingiber officinale roscoe)的根茎,又名地辛、百辣云,形如掌状, 是世界范围内广为种植的一种根茎类香辛调味料,也是迄今为止国际贸易中最为重要的一种根茎类香料[1]。同时在中国,乃至整个亚洲地区,它还是一种传统的药食两用植物,具有散寒解表、温中止吐、回阳通脉、燥湿消痰的功效。现代医学研究表明:生姜具有抗凝、抗氧化、抗肿瘤、升压强心、降血脂、抗动脉粥样硬化、保护胃黏膜、保肝利胆、消炎、镇咳、防晕止吐、对中枢神经抑制等多种功效[2]。
姜酚(gingerol)是生姜中具有生物活性的酚类化合物,也是生姜中辣味的主要成分,含量约为生姜干重的2%-3%,姜酚包括6-姜酚、8-姜酚、10-姜酚和 12-姜酚等[3]。
姜酚的功能特性十分丰富,姜酚具有很强的抗氧化活性,其抗氧化能力比丁基羟基茴香醚、二丁基羟基甲苯、维生素c、维生素e更高,6-姜酚、8-姜酚和10-姜酚均可有效清除 dpph、超氧化物和羟基自由基,其中 10-姜酚的抗氧化能力优于另外两种姜酚抑菌作用[4]。姜酚具有抑菌作用,姜酚对革兰氏阴性菌、革兰氏阳性菌、酵母和真菌均具有一定的抑制作用[5]。姜酚还具有强心、降血脂、降血糖与降血压作用,6-姜酚、8-姜酚和10-姜酚可通过激活骨骼肌浆内质网相酶,增加心肌细胞肌浆内质网摄取而加强心肌收缩力,姜酚的强心作用随侧链碳原子数的增加而降低[6]。6-姜酚可显著降低受试糖尿病小鼠的血糖、降、低甘油三酯、胆固醇、游离脂肪酸和低密度脂蛋白胆固醇的水平,还可有效地通过调节胰岛素保护由重金属元素砷导致的氧化毒性和高血糖[7]。此外,姜酚具有舒张血管的作用,高血压的受试动物降压效果与姜酚之间成剂量正比关系。姜酚具有抗炎、抗癌作用,姜酚能够抑制前列腺生物合成起到抗炎作用。姜酚通过提高细胞抗氧化能力,预防和治疗老年痴呆症,抑制酸性物质、酒精等对胃引起的伤害,预防胃粘膜损伤,通过抑制前列腺素的合成以及呕吐受体通道,起到止呕的作用等[8]。
2. 研究内容和预期目标
研究内容:
1.传统平板计数探究姜酚对两种益生菌(双歧杆菌和乳酸菌)与caco-2细胞黏附定植的作用
2.传统平板计数探究姜酚对两种益生菌(双歧杆菌和乳酸菌)与ncm-460细胞黏附定植的作用
3. 国内外研究现状
肠道正常菌群对人体有一系列有益作用,包括帮助消化、调节肠道免疫、阻止病原菌定植、维持微生态平衡等。在肠道正常菌群的众多细菌中,乳杆菌和双歧杆菌常常作为益生菌添加到多种发酵乳制品中并发挥改善肠道菌群的作用。而要达到较好的维持效果,能够黏附于或定植于消化道勃液层是前提条件之一。
钱程[7]在2005年研究了益生菌黏附及免疫调剂机理。通过对双歧杆菌dm9227对大肠癌细胞系ccl-187细胞的粘附实验,观察了环境ph值和钙离子浓度对双歧杆菌粘附的影响。实验结果表明,不同ph值条件下,双歧杆菌对ccl-187细胞的粘附效果有较大差异:在ph为6.0-7.0左右时,ccl-187细胞上粘附的双歧杆菌数量最多;而当ph高于7.0或低于6.0时,细菌的粘附数量明显呈下降趋势。而在固定ph的条件下,在环境中加入ca2 鳌合剂edta时(相当于钙离子浓度为0)。粘附在细胞周围的细菌数明显低于含有2mmol/l钙离子时的粘附细菌数。当钙离子浓度大于2mmol/l并逐渐升高时,粘附细菌数呈下降趋势。表明双歧杆菌对癌细胞的粘附作用是钙依赖性的,同时对钙离子浓度的耐受能力是有限的。
郭彤[8]等人在2008年研究了嗜酸乳杆菌和两歧双歧杆菌体外粘附caco-2细胞及其对病原菌粘附性能的影响,以 caco-2 细胞作为体外模式,观察嗜酸乳杆菌、两歧双歧杆菌对caco-2细胞的粘附特性,并探讨嗜酸乳杆菌和两歧双歧杆菌的抗粘附作用。结果表明,所试2种细菌菌株均表现出很强的粘附caco-2细胞的特性。
4. 计划与进度安排
2022年1月8日-2022年1月15日:开题报告,确定实验题目,查阅相关文献,进行实验准备。
2022年1月16日-2022年3月20日:传统平板计数探究姜酚对两种益生菌(双歧杆菌和乳酸菌)与caco-2细胞黏附定植的作用
2022年3月21日-2022年3月25日:传统平板计数探究姜酚对两种益生菌(双歧杆菌和乳酸菌)与ncm-460细胞黏附定植的作用
5. 参考文献
[1]]李素民,杨秀岭,赵智,等.干姜和生姜的药理研究进展[j] .中草药, 1999, 30(6):471-473.
[2]张建新,李兰芳.生姜的药理作用[j] .河北医药, 1993, 15(6):374-376.
[3]杨鹏,于博,汤尚文,等.姜酚及其应用研究进展[j].工程技术,2017,04(32):78-80.
