1. 研究目的与意义、国内外研究现状（文献综述）
纳豆激酶是一种丝氨酸碱性蛋白酶，在溶血栓相关的药物的研发中有着重要意义[1]。
诸多的研究者进行的体内和体外血栓溶解实验表明，纳豆激酶可从消化道吸收到血液中，溶血栓的作用显著[2]。
本实验意义在于通过对培养基的各种组成成分包括碳源、氮源、缓冲液成分和无机离子等种类和用量进行优化研究，以提高重组地衣芽孢杆菌的产酶能力，为进一步的大规模发酵生产提供实验基础。
2. 研究的基本内容和问题
本研究主要目标是通过对重组的地衣芽孢杆菌的培养基进行优化，以达到提高该重组菌发酵产生酶的效率，主要衡量指标是发酵液中的酶的活力。
该研究的主要内容有：一、单因素试验初步确定最佳碳源、氮源、无机离子、缓冲盐等设置对照，同时配置不同的培养基，同时设置对照，以发酵后的粗酶液的活力筛选出最佳的培养基成分。
二、确定培养基的各种组分的用量配比。
3. 研究的方法与方案
研究方法、技术路线、实验方案及可行性分析本研究主要采用实验研究法，即通过不同的培养基试验，得到的酶活结果来最终解决问题的方法。
技术路线：实验方案：1.单因素实验1.1最佳碳源的初步探索配置以下培养基并编号：对照组（0）：蔗糖40g/l,葡萄糖10g/l,豆粕粉20g/l，磷酸氢二钠10g/l，ph7.5实验组（1-7）：共同的组分：豆粕粉 40g/l，磷酸氢二钠 10g/l每组的不同碳源：编号 1 2 3 4 5 6 7碳源 葡萄糖 蔗糖 麦芽糖 乳糖 可溶性淀粉 玉米粉 马铃薯淀粉用量（g/l） 50 50 50 50 50 50 50每个实验组配置两瓶，每瓶50ml/250ml，121℃，灭菌20min。
接种后37℃，180rpm摇床培养48h，之后水解圈法测定酶活。
4. 研究创新点
特色或创新之处本实验特色：1，采用分解圈法测酶活力，不同于以往测定吸光度或进行液体反应的酶活测定方法，更加直观，更加便于记录和减少误差，一个大型培养皿可以处理40多个样品，大大节省了实验器材的占用。
2.采用了响应曲面法分析不同的因素水平的影响，大大降低了实验次数，节省了实验材料。
3.培养基组成简单，减少了复杂组分对实验结果的干扰。
5. 研究计划与进展
研究计划及预期进展2018年3月份，大概完成各项组分的单因素试验，确定最合适的碳氮源2018年4月份，完成各项组分用量的单因素试验，预期确定各组分的用量。
2018年5月份，完成发酵条件优化和响应曲面试验。
