1. 研究目的与意义
研究背景:稀有糖在自然界中虽然含量少,但在食品、医药等领域发挥重要作用,逐渐成为国内外研究的热点。传统研究稀有糖的生产主要包括生物法和化学法。化学合成法通常有步骤繁琐、光学纯度不够高,且大量使用有机溶剂造成的系列环境问题等缺点,因而探索生物法制备高价值稀有糖越来越受到广大研究人员的重视。目前,微生物及其酶法转化制备稀有糖因反应过程容易、反应条件温和且对环境友好,因而探索生物法挖掘不同来源且具有宽广底物谱的酶已成为研究热点。
2. 研究内容和预期目标
主要研究内容:1)将甘油管中保存的产osrpib的工程菌菌株活化培养。
2)诱导突变体菌株产酶,并且从菌株中提取osrpib并且纯化。
3. 研究的方法与步骤
本课题拟采用的研究方法、步骤:
1.1.1 重组 osrpia 和 osrpib 的纯化
蛋白纯化的步骤:细胞培养—离心取菌体—细胞破碎—离心获得粗酶—镍柱
4. 参考文献
[1] izumori k. bioproduction strategies for rare hexose sugars[j]. naturwissenschaften, 2002, 89(3):120-124.
[2] yeom s j, kim y s, oh d k. development of novel sugar isomerases by optimization of active sites in phosphosugar isomerases for monosaccharides.[j]. appl environ microbiol, 2013, 79(3):982-988.
[3] zhang w, zhang t, jiang b, et al. enzymatic approaches to rare sugar production[j]. biotechnology advances, 2017, 35(2):267-274.
5. 计划与进度安排
1)2019-2-20~2019-03-04:查阅资料撰写开题报告;
2)2019-03-04~2019-03-10:甘油管中保存的产osrpib的工程菌菌株培养;
3)2019-03-11~2022-04-15:诱导突变体菌株产酶,并且从菌株中提取osrpib并且纯化。
