1. 研究目的与意义
癌症严重危害人类的健康，癌是指起源于上皮组织的恶性肿瘤，是恶性肿瘤中最常见的一类。长期以来，虽然大量的抗肿瘤药物问世，但癌症的复发率、死亡率以及药物耐药性依然居高不下。近年来，随着靶向药物的问世，给广大癌症患者带来了新希望。靶向药物是指被赋予了靶向能力的药物或者其制剂。其目的是使药物或其载体能瞄准特定的病变部位，并在目标部位蓄积或释放有效成分。靶向试剂可以使药物在目标局部形成相对较高的浓度，从而在提高药效的同时抑制毒副作用，减少对正常组织、细胞的伤害。但是，目前问世的靶向药物往往价格高昂，难以为广大人们群众所承受。因此，找寻新的癌症发生的关键蛋白是癌症研究的热点和重点。
近年来，有研究发现：mek2在多种实体癌症中存在高表达、高活性，且与癌症的发生、发展、转移和侵袭等密切相关。多种mek2抑制剂已进入临床试验中。但是，由于mek2存在多个活性位点（raf磷酸化、自身磷酸化位点），何种位点是其参与肿瘤发生等多过程的关键位点。
所以，本论文拟通过genebank数据库找寻mek2的基因序列；根据所检索的蛋白晶体结构，推测其潜在的磷酸化位点。以肺癌a549细胞为材料，提取rna，反转录cdna，pcr扩增mek2全长，采用重叠延伸法，对mek2进行定点突变，连接t载体，经双酶切和测序验证。
2. 研究内容和预期目标
1. 通过检索gennbank数据库，查找mek2基因序列；
2.根据mek2的相关基因信息，确认找寻全长扩增的上下游引物，利用primer5.0软件，对上下游引物进行分析修改，以减少扩增时二聚体等非特异性扩增；
3.检索rcsb数据库，推测潜在的磷酸化微单
3. 研究的方法与步骤
1. 通过检索gennbank数据库，查找mek2基因序列；
b.2. 检索rcsb数据库，推测潜在的磷酸化微单
c. 3.培养a549细胞，提取rna，反转录为cdna。
4. 参考文献
1. 时素华,吕威, 秦丽娜,等. 基于raf/ras/erk信号通路探讨督脉电针对脊髓损伤1、7d后mek2、p-erk1的影响[j]. 中华中医药杂志,2017(7):2919-2923.2.2. procaccia s, ordan m, cohen i, et al. direct binding of mek1 and mek2 to akt induces foxo1 phosphorylation, cellular migration and metastasis[j]. scientific reports, 2017, 7:43078.
3.3. slusser-nore a, garrett s h, zhou x d, et al. the expression of keratin 6 is regulated by the activation of the erk1/2 pathway in arsenite transformed human urothelial cells[j]. toxicology applied pharmacology, 2017, 331.
4.4. caunt c j, sale m j, smith p d, et al. mek1 and mek2 inhibitors and cancer therapy: the long and winding road[j]. nature reviews cancer, 2015, 15(10):577-92.
5. 计划与进度安排
2022-2022-1学期第17-20周-2022-2022-2学期第1-4周（2022.11.25-2022.03.31）查阅文献，完成开题报告的撰写。找寻mek2基因序列；
第5-6周（2022.04.01-2022.04.15）设计引物，pcr扩增全长；
第7-8周（2022.04.16-2022.04.29） 重叠延伸法，对mek2进行定点突变；
