1. 研究目的与意义
背景：现代分子生物学正在高速发展当中，人们也发现并提取出来了很多不同的蛋白质大分子，给人类生活带来了很多益处。泛素类似的蛋白质分为两类:一类是泛素类修饰符(ubls)，其功能与泛素类的修饰符类似。ubls的例子是sumo,rub1(也称为nedd8)，apg12和hub1。第二个类的蛋白质包括帕金、rad23和dsk2，它们被指定为泛素域蛋白(udps)。这些蛋白质包含与泛素相关的域，但它们彼此无关。与ubls形成对照的是，udps不被蛋白水解处理或与其他蛋白质结合。rub1和相应的人类同系物nedd8是由e1泛素激活酶uba2激活的，形成了硫代酯之间的异肽键。nedd8显示了80%的同源性。
目的：
以人类泛素家族蛋白nedd8为研究对象，对该基因进行体外扩增，将该基因剪切后插入载体中转入大肠杆菌，在大肠杆菌中进行表达。
2. 研究内容和预期目标
主要研究内容：本次课题属于基因重组内容，主要对人类泛素家族蛋白nedd8进行体外扩增，将该基因剪切后插入载体中转入大肠杆菌，在大肠杆菌中进行表达的过程。主要内容如下为：
1、目标基因引物的设计；
2、目标基因的扩增与剪切；
3. 研究的方法与步骤
研究方法：本次课题的研究方法为实验法，是通过主动变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果联系的一种科研方法。主动设计实验，控制和排除各种可能影响实验的无关因素的干扰，并且实验具有因果性。
步骤：
1.查找文献，确定细胞中所要研究的蛋白序列；
4. 参考文献
1.何珊,张令强,贺福初.《类泛素化修饰neddylation的功能和调控机制研究进展》.《生物化学与生物物理进展》2009年 第9期.
2.吴乃虎.《琼脂糖凝胶电泳》.遗传工程1（1983）：0.8.
3.杨焕明.《基因组学》.科学出版社，2016.11.1
5. 计划与进度安排
（1）2022-2022-1学期17-20周~2022-2022-2学期第1周~第2周（2022-12-25~2022-3-16），查阅资料，目的基因序列的确定，准备开题报告，外文论文翻译； （2）第3周~第6周（2022-3-19~4-13），设计引物、选择合适酶切位点、质粒抽提、细胞培养等实验、初步设计；（3）第7周~第11周（2022-4-16~5-18），目标基因扩增、剪切、载体连接、转化、细胞培养、转化子的检测以及重组子的细胞表达等（4）第12周~第14周（2022-5-21~6-8），整理、撰写论文，完成；一张基因扩增电泳检测图、一张质粒酶切电泳检测图，一张重组子构建检测图以及一张蛋白表达电泳图（5）第15周~第16周（2022-6-11~6-19），提交重组子构建的重组细胞、实验报告、英文翻译、图表等，毕业答辩。
