1. 研究目的与意义
一、背景及目的
21世纪是追求“ 绿色” 与“ 健康”的世纪，人们越来越关注食品安全。目前，在食品添加剂市场上使用的防腐剂种类很多，但很大一部分是人工合成防腐剂，如山梨酸钾、苯甲酸钠等。如果超剂量滥用对人体可能会有一定的毒副作用。因此，开发绿色、安全、高效的生物防腐剂尤其是微生物源防腐剂成为增加市场竞争力，提高经济效益，提高人民生活质量的重要举措。微生物源防腐剂聚赖氨酸就是其中的重要代表之一。由微生物源研发出来的天然食品防腐剂ε-聚赖氨酸，因其吸湿性强，易溶于水，可生物降解，可食无毒，热稳定性好，特别是由于其防腐性强、安全性高等优点，在食品防腐剂应用方面具有巨大的商业前景。但目前在国内食品行业中，对ε-聚赖氨酸在食品防腐应用的研究还仍处于一个较单一阶段，在食品加工方面还未制定有使用卫生标准，无法作为一种常用食品添加剂全面推广使用。因此，加快对ε-聚赖氨酸的综合应用研究和工业化生产，将有助于进一步推动我国食品防腐领域的发展。
ε-聚赖氨酸（ε-poly-lysine，ε-pl）是少数链霉菌将 l-赖氨酸单体通过 α-cooh 与ε-nh2脱水缩合而成的一种氨基酸同聚物，聚合度为 25-35。由于其抑菌谱广、效价高、安全无毒，再配合其水溶性好、作用 ph 广、热稳定强等特点，ε-pl 已被广泛用作食品防腐剂。
2. 研究内容和预期目标
一、主要研究内容
本研究立足于国内外研究现状，以白色链霉菌为生产菌，在培养基中添加co2 ，研究其合成过程中一些关键酶的影响，从而从分子生物学的角度去理解白色链霉菌发酵产ε-pl的特性。具体研究内容如下：
1）通过前期探究实验，研究添加金属离子co2 的较优浓度。
3. 研究的方法与步骤
1.基础分析方法：总糖含量（苯酚-浓硫酸法）、还原糖含量（dns法）、菌体提取（离心法）、菌体浓度(湿菌体法)、ε-pl含量（甲基橙法）。
实验主要涉及到ε-pl的分析方法。糖含量的分析方法，目前主要采用斐林试剂滴定法、还原糖测定仪、3，5-二硝基水杨酸法等测定总糖含量和还原糖含量。ε-pl含量的分析方法，目前使用最为广泛的为甲基橙法。为了使实验数据尽可能的准确，实验数据每个水平均设有两到三个平行组取其平均值，多个水平进行。
2.酶活性测定
4. 参考文献
[1] hiraki j,ichikawa t, ninomiya s, et al. use of adme studies to confirm the safety of ε-polylysine as a preservative infood[j]. regulatory toxicology and pharmacology, 2003, 37(2): 328-340.
[2] shih i l, shenm h, van y t. microbial synthesis of poly (epsilon-lysine) and its variousapplications[j]. bioresource technology, 2006, 97(9): 1148-1159.
5. 计划与进度安排
1）2022-03-04～2022-03-10：查阅资料撰写开题报告；
2）2022-03-11～2022-03-16：斜面培养基制备与菌种的活化；
