白头翁皂苷B4衍生物的分离制备工艺研究开题报告

 2022-03-12 15:07:23

1. 研究目的与意义

一.本课题研究的背景、目的及意义

1.研究背景

1.1皂苷

皂苷(saponin)别称:碱皂体;皂素;皂甙;皂角苷;或皂草苷。“皂苷”一词由英文名Saponin意译而来,英文名则源于拉丁语的Sapo,意为肥皂。皂苷(Saponin)是苷元为三萜或螺旋甾烷类化合物的一类糖苷,主要分布于陆地高等植物中,也少量存在于海星和海参等海洋生物中。许多中草药如人参、远志、桔梗、甘草、知母和柴胡等的主要有效成分都含有皂苷。

1.2.皂苷的作用与功效

皂苷类物质的生物学作用包括:调节脂质代谢、降低胆固醇 ;抑制微生物作用;抑制肿瘤作用;抗血栓作用;免疫调节作用;抗氧化作用等等。

1.3.白头翁和白头翁皂苷

白头翁(拉丁学名:Pulsatillachinensis (Bunge)Regel),毛茛科,白头翁属多年生草本植物,长有根状茎,叶片呈卵形,花萼蓝紫色。别名有奈何草、粉乳草、白头草、老姑草等等。

分布在中国的吉林、辽宁、河北、山东、河南、山西、陕西、黑龙江等省的山岗、荒坡及田野间。有清热解毒、凉血止痢、燥湿杀虫的功效,具有很高的药用价值。白头翁在园林中可作自然栽植,用于布置花坛、道路两旁,或点缀于林间空地。是理想的地被植物品种。喜凉爽干燥气候。耐寒,耐旱,不耐高温。以土层深厚、排水良好的砂质壤土生长最好,冲积土和粘壤土次之,而排水不良的低洼地不宜栽种。

白头翁皂苷均为五环三萜类皂苷其皂苷类型主要分为齐墩果酸皂苷元、常春藤皂苷元和羟基白桦酸皂苷元三类。

在中国分布于四川(宝兴,海拔3200米)、湖北北部、江苏、安徽、河南、甘肃南部、陕西、山西、山东、河北(海拔200-1900米)、内蒙古、辽宁、吉林、黑龙江。生平原和低山山坡草丛中、林边或干早多石的坡地。在朝鲜和苏联远东地区也有分布。

2.研究目的及意义

本实验的研究目的是设计一种白头翁皂苷的制备方法,使之能够应用于工业生产制备。工厂化生产得到的大量的白头翁皂苷可以为临床医药实验提供材料基础。

2. 研究内容和预期目标

二.本课题主要研究内容和预期目标

2.1.主要研究内容

⑴、白头翁根的材料的准备与粉碎。

⑵、白头翁根的提取物制备。

⑶、白头翁根的提取物通过大孔树脂、DEAE阴离子树脂、中压制备系统等技术手段得到单一的白头翁皂苷B4衍生物。

2.2.预期目标

(1)、了解与掌握白头翁皂苷的含量测定方法。

(2)、熟练使用液相色谱分析技术。

(3)、学会使用中压、高压制备系统。

(4)、分离纯化得到的白头翁皂苷纯度能够到达100%。

3. 研究的方法与步骤

三.本课题拟采用的研究方法、步骤

3.1. 研究技术:

柱层析技术、液相色谱分析法、中压制备技术、高压制备技术等。

3.2. 步骤:

1)称取一定质量的白头翁打粉,并计算其理论白头翁皂苷含量;

2)以2倍柱体积蒸馏水、10%乙腈、20%乙腈、50%乙腈、75%乙腈纯和乙腈为流动相分离杂质,收集≥10%乙腈的洗脱液,将收集的各浓度梯度的洗脱液静置,抽滤除去大颗粒和析出物质。

3)中压:将前面所得滤渣滤液分别用一定比例的乙腈进一步分离;

4)分离所得流出液检测目的物质含量较高的一部分进行浓缩干燥;

5)将上述所得样品纯乙腈溶解,高压上样分离、检测;

6)将高压分离得到的高纯度收集液合并,并进行除水、旋蒸干燥;

7)最终获得纯度99%的白头翁皂苷。

4. 参考文献

四. 本课题主要参考文献

[1] 曾栋, 陈波, 罗旭彪, 等. 大孔吸附树脂对紫锥菊提取物中菊苣酸分离纯化的研究[J]. 天然产物研究与开发, 2004, 16(2):160-162.

[2] 姜海,JIANG Hai, 杨柳, 等. 苍耳子的化学成分研究[J]. 中草药, 2017, 48(1):47-51.

[3] 李熹. 高速逆流色谱法分离纯化艾叶化学成分、提取条件优化及结构鉴定[D]. 湖南师范大学.

[4] 周杰, 国兴明, 徐裕彬, 等. 贵州中药雪里见化学成分分离和纯化的初步研究[J]. 山地农业生物学报, 2005, 24(3):265-267.

[5] 田晓卉, 周超, 喻长远, 等. 茵陈配方颗粒中的化学成分分离鉴定[J]. 中国实验方剂学杂志, 2017,(3):55-59.

[6] 杨熟英, 李振麟, 赵艳敏,等. 黄蜀葵花化学成分研究[J]. 西北药学杂志, 2017, 48(14):1597-1600.

[7] 黄积武, 李创军, 杨敬芝, 等. 三七叶的化学成分及其抗氧化活性研究[J]. 中草药, 2017, 48(21):4381-4386.

[8] 荆文光, 孙晓波, 兰青山, 等. 芸薹子中含氮类化学成分分离鉴定[J]. 中国实验方剂学杂志, 2019,(10):127-133.

[9] 师帅, 张建培, 刘婷, 等. 金莲花化学成分的分离与结构鉴定[J]. 沈阳药科大学学报, 2017,(4):297-301.

[10] 吴希芝, 谢海琴, 龙秀红, 等. 长春花化学成分的研究[J]. 中国药学杂志, 2017, 52(8):631-636.

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[12]Merle G., Maximilian P. W. S., Daniel B. W.,et al. Purification of firederived markers for μg scale isotope analysis (δ13C, Δ14C) using highperformance liquid chromatography (HPLC)[J] Organic GeochemistryVolume,2014,70: 1-9.

5. 计划与进度安排

五.本课题的具体进度安排(包括序号、起迄日期、工作内容)

1、第17周(19-20-1学期)-第3周(2022年12月23日--2022年3月15日)接受任务、查阅和翻译文献、撰写及完成开题报告

2、第4周(2022年3月16日--2022年3月22日) 了解与掌握白头翁皂苷的含量测定方法, 白头翁根的材料准备、粉碎与提取;

3、第5周-第13周(2022年3月23日--2022年5月24日)白头翁根的甲醇提取物通过中压制备系统、高压制备等技术手段得到单一白头翁皂苷;

4、第14周-第15周(2022年5月25日--2022年6月5日)分析数据、撰写毕业论文、答辩PPT

指导教师意见:

指导教师:

2022年 3 月 6日

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