生产辅酶Q10根瘤土壤杆菌化学诱变筛选研究开题报告

 2022-03-22 20:31:35

1. 研究目的与意义

1.1背景和目的 辅酶q10(coenzyme q10)是一类与维生素k类有共同特征的脂溶性醌类化合物,存在于大自然的很多生物体中,且具有特定的生物活性。

辅酶q10是黄色或淡黄色结晶性粉末,无臭无味,易溶于氯仿,苯,四氯化碳,与光分解成红色物质,对温度和湿度较稳定,熔点49℃。

辅酶q10在人体中主要作为一种代谢激活剂,能激活细胞呼吸,加速产生三磷酸腺苷(atp),并起到解毒急救作用,可改变细胞和组织缺氧状态,对肝、脑、心脏及神经系统起很好的保护作用,它还能增强体内的非特异性免疫力。

剩余内容已隐藏,您需要先支付后才能查看该篇文章全部内容!

2. 研究内容和预期目标

2.1 主要研究内容:毕业论文的主要研究内容(在摇瓶中进行如下实验):本研究立足于国内外研究现状,在现代微生物诱变遗传育种技术、生物生化技术等多学科基础上,利用化学诱变(亚硝基胍),以对羟基苯甲酸和维生素k3为前体,来筛选出高产的突变菌株,以期获得遗传性能稳定的辅酶q10高产菌株。

具体研究内容如下:1)研究确定亚硝基胍诱变时间,向菌悬液中加入相同体积的亚硝基胍母液,调节终浓度为0.5mol/ml,诱变时间为0min,10min,20min,30min,40min,50min,60min。

稀释涂布平板,48h后观察菌落生长情况,获得菌落数,算出致死率,根据获得的亚硝基胍诱变的致死率,从而根据亚硝基胍诱变致死率得出最佳亚硝基胍诱变时间。

剩余内容已隐藏,您需要先支付后才能查看该篇文章全部内容!

3. 研究的方法与步骤

3.1主要研究方法:摇瓶发酵。

3.2发酵工艺流程:菌种母斜面→菌种子斜面→液体种子→摇瓶种子→发酵生产→离心分离菌体,收集沉淀烘干→提取辅酶q10→参数分析。

3.3实验方法:(1)菌种母斜面:这是老师直接购买和紫外诱变得到的菌株,并于4℃冰箱保存。

剩余内容已隐藏,您需要先支付后才能查看该篇文章全部内容!

4. 参考文献

1..Fir M M, Smidovnik A, Milivojevic L, Zmitek J, Prosek M. Studies of CoQ10 andcyclodextrin complexes: solubility, thermo- and photo-stability. Journal of Inclusion Phenomena and Macrocyclic Chemistry, 2009,64: 225-232.2.Lenaz G,Fato R,Formiggini G.2007.The role of coenzyme Q in mitochondrial electron transport.Mitochondrion, 7: 8~333.Gale PH, Koniuszy FR, Page AG Jr, Folkers K (1961) Coenzyme Q. XXIV. On the signicance of coenzyme Q10in human tissues. Arch Biochem Biophys 93:2112134.Bentinger M,Brismar K,Dallner G.2007.The antioxidant role of coenzyme Q. Mitochondrion, 7(Suppl.1): S41~S50.5.Ernster L, Dallner G (1995) Biochemical, physiological and medical aspects of ubiquinone function. Biochim Biophys Acta1271:1952046.Folkers K,Osterborg A,Wu Z F.1997.Activities of vitamin Q10 in animal models and a serious deficiency in patients with cancer. Biochemical and Biophysical Research Communications, 234:296~299.7.欧阳平凯,胡永红.辅酶Q10的生产及其应用.化工进展,1994.13(4):9~11.8.金文虎, 金晶, 冀亚飞, 辅酶Q10的合成 《有机化学》2007年12期9.Jin-Ho Choi,Yeon-Woo Ryu,Jin-Ho Seo. Biotechnological production andapplications of coenzyme Q10[J]. Appl. Microbiol. Biotechnol.2005,68:9-15.10.王青云,王发祥,钟士清.微生物发酵法生产辅酶Q10的研究进展[J].化学与生物工程.2006,23(8):l1~13.11.刘克杉, 吴文芳, 韩斯琴, 徐梅, 吕安国, 孙静波,辅酶Q10高产菌株的选育 ,《沈阳农业大学学报》2005年1期 .12.张向阳, 刘登如, 堵国成, 陈坚,辅酶Q10产生菌的抗性筛选及发酵条件优化 ,《工 业微生物》2007年3期 .13.潘春梅, 堵国成, 陈坚. 辅酶Q10高产菌Rhizobium radiobacter的选育及发酵条件优化. 过程工程学报, 2004,4(5): 451-456..14.吴祖芳,堵国成,陈坚.2003b.放射型根瘤菌WSH2601生产辅酶Q10的摇瓶发酵条件.无锡轻工大学学报,22(1):65~69.15.李聚海, 岳田利, 袁亚宏. 辅酶 Q10超声波破碎法提取工艺条件研究. 西北农林科技大学学报(自然科学版), 2007,35(5): 207-211.16.许芳,张淑荣,张鹏.酶解和冻融辅助超声提取光合细菌中辅酶Q10的研究[J].化学与生物工程,2008,25(8):434517.吴祖芳, 堵国成, 陈坚.发酵液中辅酶Q10的分离纯化和定量分析. 无锡轻工大学学报, 2002, 21(4):420-423.18.王根华,钱和,肖刚.2003.发酵菌体中辅酶的提取及其测定方法.无锡轻工大学学报,22(2):59~62.19.姜剑文,陈光,王立梅等.根癌农杆菌发酵生产辅酶Q10的培养条件优化[J].安徽农业科学,2010,38(12):6128~6130.20.王步江,张陈云,樊秀花.2010.响应面法优化产油酵母发酵培养基.中国酿造,(7):127~129.

5. 计划与进度安排

本论文的各阶段安排为:1)2022-03-01~2022-03-19:查阅资料撰写开题报告;2)2022-03-20~2022-04-10:斜面培养基制备与菌种的活化;3)2022-04-11~2022-04-30:化学诱变时间确定实验;4)2022-05-01~2022-05-12:前体添加量确定5)2022-05-13~2022-05-20:化学诱变并筛选获得高产菌株实验;6)2022-05-21~2022-06-10:补充实验,整理试验数据和结果,撰写论文;7)2022-06-11~2022-06-26:修改补充论文,准备答辩。

剩余内容已隐藏,您需要先支付 10元 才能查看该篇文章全部内容!立即支付

发小红书推广免费获取该资料资格。点击链接进入获取推广文案即可: Ai一键组稿 | 降AI率 | 降重复率 | 论文一键排版