1. 研究目的与意义
背景：ε-聚赖氨酸具有良好的抑菌效果，因而常被用来制备食品防腐剂。nad激酶作为一种辅酶，它包括两种激酶：nad 激酶和nadh激酶，可以催化nad 和nadh发生磷酸化。
目的：nad激酶辅酶调控技术实现ε-pl的超量合成及有效分泌。为了能更低成本、更高效的提取ε-聚赖氨酸，因此探究白色链霉菌体内影响ε-聚赖氨酸产生的因素。
2. 研究内容和预期目标
本研究立足于国内外研究现状，以白色链霉菌为生产菌，通过研究其nad激酶活性，研究其酶活性对生产ε-pl含量的特点，具体研究内容如下：
1）通过前期探究实验，研究添加金属离子co2 的较优浓度。
2）利用摇瓶进行发酵实验，研究其nad激酶活性和ε-pl含量的关系。
3. 研究的方法与步骤
研究方法：提取粗酶
步骤：收集菌体，离心，再收集菌体细胞，用knde缓冲液洗涤2次，称湿重（计算出来）。[以1g菌体加10mlknde缓冲液计]重悬细胞，在冰水里超声波破碎（冷冻破碎，-80℃，3次），12000rpm离心10min后，收集上清得到粗酶液。
反应过程为安下表反应体系混匀反应物，在30℃反应1h，沸水浴加热5min，置于冰上冷却，离心收集0.9ml上清液，加入0.1ml50mm的6-磷酸葡萄糖，混匀，测定od340值；加入10ul0.05u/ul的6-磷酸葡萄糖脱氢酶，在37℃反应10min，测定od340值。
4. 参考文献
[1] hiraki j, ichikawa t, ninomiya s, et al. use of adme studies to con?rm the safety of ε-polylysine as a
preservative in food [j]. regul toxicol pharm, 2003, 37(2): 328-340.
[2] 刘慧, 徐红华, 王明丽,等.聚赖氨酸抑菌性能的研究[j].东北农业大学学报,2000,31:294- 298
5. 计划与进度安排
1）2022-03-04～2022-03-10：查阅资料撰写开题报告；
2）2022-03-11～2022-03-16：斜面培养基制备与菌种的活化；
3）2022-03-17～2022-04-01：通过前期探究实验，研究添加金属离子co2 的较优浓度；
