核糖-5-磷酸异构酶B突变体与D-木糖对接研究开题报告

 2022-04-03 22:39:11

1. 研究目的与意义

除d-葡萄糖等少数单糖外,多数自然界中存量稀少的单糖及衍生物被称“稀有糖/稀少糖”(rare sugars)。

我国糖尿病患者超过一亿,肥胖人口数量也位居世界第一,稀有糖具有高甜度、低热量等特性,是良好的代糖,也可用于制备活性药物成分。

现阶段,稀有糖主要由酶催化等生物技术方法制备。

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2. 研究内容和预期目标

本实验拟对来自苍白杆菌(ochrobactrum sp.)csl1的核糖-5-磷酸异构酶osrpib对l-核糖的反应机理进行研究。

首先根据其三维结构信息设计突变位点,随后使用swiss- model 在线服务器进行osrpib突变体蛋白质三维结构建模,对获得的结构进行评估和优化,得到较为准确的蛋白结构。

利用较为准确的蛋白结构与l-核糖进行分子对接,对得到的结果进行分析,并以最优突变体作为出发点进行下一轮突变和对接。

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3. 研究的方法与步骤

一、分子建模采用swiss- model服务器(http://swissmodel.expasy.org/),通过序列搜索获得覆盖率和相似度较高的模板,以该模板产生三维结构,对所产生结构的评价采用拉氏图进行,对所产生结构的优化采用moe软件中的amber ff10力场进行。

二、蛋白结构与底物的对接前准备、对接过程及对接结果采用ucsf chimera软件进行(具体对接程序为autodock vina)。

三、对接结果的分析采用pymol软件进行。

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4. 参考文献

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[2] Barker WC, Garavelli JS, Huang H, et al. The Protein Information Resource (PIR) [J]. Nucleic Acids Research,2000,28(1):41-44.
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[4] 王英超,党源,李晓艳,王兴龙.蛋白质组学及其技术发展[J].生物技术通讯, 2010,01:139-144.
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[6] 李衍达,生物信息学基因和蛋白质分析的使用指南[M],北京:清华大学出版社,2000:246-247.
[7] Zhang, W., Zhang, T., Jiang, B. Mu, W. Enzymatic approaches to rare sugar production[J]. Biotechnol. Adv. 2017, 35, 267–274.
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[9] Zhang, X. et al. Exploring multifunctional residues of ribose-5-phosphate isomerase B from Ochrobactrum sp. CSL1 enhancing isomerization of D-allose[J]. J. Agric. Food Chem. 2020, 68, 3539–3547.

5. 计划与进度安排

1 2022 11-2022 12 查阅文献,撰写开题报告和前言
2 2022 01-2022 02 完成虚拟突变和对接筛选
3 2022 03-2022 04 根据筛选情况完成第二轮和第三轮突变和筛选工作
4 2022 05-2022 06 撰写毕业论文,准备答辩ppt

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