1. 研究目的与意义
研究目的:血小板衍生生长因子PDGF是于1974年发现的一种刺激结缔组织等组织细胞增长的肽类调节因子,因其来源于血小板而得名。我们要研究出一种简单的方法分离提纯出高纯度的PDGF-B的二聚体
研究意义:PDGF在创伤修复、动脉粥样硬化、胚胎发生和发育以及肿瘤形成匡
细胞增殖和细胞定向运动中起着重要的作用.国外已成功地从人血小板中分离出高纯度的PDGF,但方法复杂,费用较高.我们采用较为简单的方法从猪血小板中提取和纯化较高纯度的PDGF,为研究猪血小板衍化生长因子的理化和生物学特性及其应用打下基础2. 国内外研究现状分析
国内第二军医大学曾对血小板衍生生长因子的分离提纯方法进行研究,提出了一种简答,快捷,便宜的方法,为中国工业化生产PDGF做了重要的基础研究
3. 研究的基本内容与计划
研究内容:
1. pdgf-b重组蛋白质粒构建2. 大肠杆菌表达筛选和优化3. 包涵体表达产物获取4. 包涵体蛋白纯化增溶探索5. 变性蛋白二聚体复性探索6. 二聚体活性检测分析
研究计划:
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4. 研究创新点
用不同浓度的洗脱液对样品进行冲洗,比较不同浓度洗脱液洗脱下样品的浓度。
同时改进蛋白复性溶液配比,提高提纯蛋白浓度
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