1. 研究目的与意义
银杏叶中主要含有12种漆酚酸类化合物,这些成分与致敏、致突变有关。
银杏酸为烃基取代水杨酸衍生物,现代毒理学研究表明,银杏酸具有致敏性、胚胎毒性、致癌、致突变、肾毒性、免疫毒性和细胞毒性等生物毒性,被认为是银杏叶提取物(egb)中最主要的毒副作用成分。
关于银杏酸毒性机制的研究,目前主要集中在肝损伤和致敏性两个方面。
2. 国内外研究现状分析
国内外对银杏酸分离除杂多采用化学提纯手段,有报道采取有机溶剂萃取法、二氧化碳超临界萃取、柱色谱分离、大孔吸附树脂富集等方法。
德国schwabe 药厂1991 年专利提出白果酚不高于10 μgg - 1,该专利报道了银杏酸的脱除方法,以丙酮提取,有机溶剂萃取,脱脂等一系列处理可使得烷基酚酸在10 μgg - 1 以下( 特别可达到1 μgg - 1 以下) 。
hideji将外种皮粗粉以甲醇提取,加适量水用氯仿萃取,萃取物分别经硅胶色谱柱( 氯仿-甲醇,9 1) 和氧化铝色谱柱( 苯-醋酸乙酯,1∶ 1) 处理,硅胶色谱柱处理后再经ods 色谱柱洗脱得3 种酸性成分,氧化铝柱处理后经ods 色谱柱精制得总银杏酚和总白果酚。
3. 研究的基本内容与计划
2. 实验方案及计划a、实验方案1. 在细胞水平考察银杏酸对肝细胞的促凋亡和周期阻滞作用;2. 在细胞水平考察银杏酸对肝细胞中增殖信号通路相关蛋白表达的影响;3. 体内考察银杏酸对小鼠肝组织的损伤作用。
b、实验计划2016.02:阅读指定文献,对实验方法及内容进行了解并撰写文献综述。
2016.03:开始建动物模型,灌胃给予总银杏酸,1个月后检测相应指标;2016.03-04:细胞水平考察银杏酸的作用机制,包括促凋亡、周期阻滞、增殖信号分子的表达等;2016.05: 检测动物模型肝功能指标,处理实验数据,撰写论文并修改。
4. 研究创新点
此外,根据银杏酸的毒性机制,引起毒性反应的物质可能是银杏酸Ⅰ相代谢产物,因此,可考虑从毒性机制方面入手,联合应用对CYP450亚型CYP3A 和CYP 1A 具有抑制作用的中药可否达到配伍减毒效果,为中药配伍减毒提供又一思路。
由此设想,复方制剂可能有益于提高银杏叶制剂的用药安全,因此,复方银杏叶制剂配伍减毒研究对探索一条具有中医药特色的银杏叶制剂产业发展道路,促进我国银杏产业的可持续发展有着积极的作用。
