1. 研究目的与意义
随着不可再生能源的枯竭,可再生资源特别是纤维素的利用以引起全世界的关注。在生物质能源的开发中,纤维素酶起到重大的作用,而β-葡萄糖苷酶更是重中之重。以β-葡萄糖苷酶开展的系列研究具有重大的理论和实际应用价值。本研究对已在毕赤酵母中实现表达的黑曲霉β-葡萄糖苷酶的基因进行全基因优化,以进一步提高β-葡萄糖苷酶的表达量,同时应用响应面设计优化其表达条件。实现β-葡萄糖苷酶基因在毕赤酵母中的高效表达。促进植物纤维生物转化乙醇技术的日趋完善及工业化进程。
2. 国内外研究现状分析
由于β-葡萄糖苷酶的原核表达不理想,目前国内外对β-葡萄糖苷酶研究主要集中于真菌。
相对于原始菌株表达量不高,异源表达以作为提高表达量得重要手段。
关于β-葡萄糖苷酶的克隆及异源表达的研究主要集中在木霉,关于黑曲霉β-葡萄糖苷酶基因的表达研究不多,其中以赵林果克隆表达的黑曲霉β-葡萄糖苷酶达到的酶活最高。
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3. 研究的基本内容与计划
研究内容如下:
1.对已有的黑曲霉β-葡萄糖苷酶基因进行全基因优化。
2.全基因优化后的β-葡萄糖苷酶基因的真核表达。
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4. 研究创新点
(1)对β-葡萄糖苷酶基因进行全基因优化
(2)通过响应面设计优化表达条件进一步提高β-葡萄糖苷酶的表达量;
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