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1. 研究目的与意义、国内外研究现状（文献综述）
课题的意义、国内外研究进展、应用前景等（列出主要参考文献）
研究意义
土壤具备了各种微生物生长发育所需要的营养、水分、空气、酸碱度、渗透压和温度等条件，为微生物提供了良好的生长环境，而土壤微生物中细菌的数量最多[1]。同时，其中许多细菌能产生有关抑菌活性物质[2]，可利用其分泌抗菌活性物质这一特性，实现有效拮抗病原菌；促进植物生长；防治植株病害；生产有效保健品以及医药产品、化妆品等。在生物防治，食品，医药等领域中具有重要应用，通过对土壤中具有抑菌活性的细菌的分离以及鉴定，可丰富相关有抑菌功能的细菌在相关领域的应用价值。
2. 研究的基本内容和问题
研究目标：
通过对成都市白塔湖景区釆集的土壤进行细菌的筛选，旨在得到具有抑菌活性的菌株，对分离自土壤的菌株进行分类鉴定，提取基因组dna后 pcr扩增 16s rdna，基因测序并进行同源性分析，构建进化树并进行系统发育分析，结合培养特征、生理生化特征，优化抑菌功能的细菌的发酵条件并对其进行进一步的研究。
研究内容：
3. 研究的方法与方案
| 研究方法、技术路线、实验方案及可行性分析 研究方法： ⑴稀释法 ⑵平板划线法 ⑶注平板法 ⑷聚合酶链式（PCR）反应 ⑸发酵分析 ⑹构建系统发育树 技术路线： 采集土样
稀释法、平板划线法 菌种分离纯化
甘油 菌种保藏
注平板法 抑菌活性鉴定
发酵条件优化
PCR技术、构建系统发育树菌种鉴定
实验方案： 实验前准备 1、样本：成都市白塔湖景区土壤 2、配置细菌培养基（高氏一号培养基） 细菌培养基的配置 高氏一号培养基：配方KNO30.1gK2HPO40.05gMgSO4·7H2O0.05gNaCl0.05gFeSO4·7H2O0.001g（母液）灭菌1.05kg/cm2，20min配制时，先用少量冷水，将淀粉调成糊状，倒入少于所需水量的沸水中，在火上加热，边搅拌边依次逐一溶化其他成分，溶化后，补足水分到100ml，调pH，121℃灭菌20min。高温灭菌后，倒平皿前加入10%酚2滴至100ml培养基中混匀，将培养基倒入平皿内约15ml/皿。高氏1号：可溶性淀粉（20g），KNO3（1g），K2HPO4（0.5g），MgSO4·7H2O（0.5g），NaCl（0.5g），FeSO4·7H2O（0.01g），琼脂20g，pH=7.4-7.6 3、离心管ddH2O稀释、平板、枪头 （121℃灭菌30min） 4、研钵，剪刀，镊子用前需酒精消毒并于紫外超净台灭菌30分钟
实验步骤 （1）菌种分离纯化（菌种纯化后及时做好菌种保藏1微升菌液） （2）菌种纯化的初步鉴定：注平板法测抑菌活性 （3）基因组DNA提取（试剂盒）细菌 （4）电泳验证（判断DNA是否提出） （5）PCR扩增（常用体系*4，选择合适的程序） （6）电泳90V （7）PCR产物回收（试剂盒）BIDTEKE CORPORATION （8）电泳验证（是否含有目的片段）条带是否在所P的体系范围 （9）TA克隆 （10）PCR扩增（WYL程序、引物M13-47/M13-RV） （11）电泳验证（是否含有存（4）扩增的目的片段） （12）测序 （13）画系统发育树
可行性分析： 研究表明，土壤中具有抑菌活性的细菌种类较多，能筛选得到有抑菌活性的细菌的概率大，实验可操作性强；项目指导老师长期专注于土壤中细菌的分离以及鉴定等相关研究，为该实验项目奠定了良好的研究基础；本实验项目思路清晰，具体操作流程明确，需要的成果很明确；本实验所需的仪器和设备在指导老师的实验室内基本齐全，完全能够满足实验开展的基本要求。 综上所述，本实验项目理论上可行，研究方法和技术上较为成熟，指导老师所在实验室和单位所在平台具备完善的实验条件和基础，能保证实验项目顺利完成。
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4. 研究创新点
特色或创新之处
1.通过查阅有关文献以及请教老师及实验室师兄师姐，可判断土壤中具有抑菌活性的细菌类型主要为放线菌，故直接以高氏一号培养基进行细菌分离纯化，可有效提高实验操作效率，并且能够高效分离得到抑菌活性菌株。
2.本实验以筛选到具有抑菌活性的放线菌为目标，筛选出目的菌株，再对其具
5. 研究计划与进展
⑴前期准备 2018.11-2019.1
建立土壤中有抑菌活性细菌的筛选与鉴定的理论基础，完成开题综述。
⑵前期实验 2019.2-2019.3
