1. 研究目的与意义、国内外研究现状(文献综述)
1、研究意义
蜂花粉是蜜蜂采集植物雄蕊(雄性生殖细胞)所得,含有丰富的营养物质,被誉为最完全的营养食品、浓缩的营养库。植物蜂花粉常规营养成分多有报道,枸杞蜂花粉营养成分除了富含各种氨基酸的报道外,其他营养成分的报道鲜见[1],氨基酸是衡量食品质量的重要依据之一,其含量与食品的营养和味道密切相关,并且氨基酸是蛋白质的基本结构单位和生物代谢过程中的重要物质,氨基酸分析技术对蛋白质化学、生物化学和整个生命科学研究以及产品开发、质量控制和生产管理等具有重要意义,广泛地应用于化工、轻工、食品加工、医药卫生行业的医药、食品、保健品等的分析[2]。
氨基酸是广泛存在于自然界中含有氨基的有机酸,是组成蛋白质的基本单位,以游离形式存在于体内的氨基酸,对调节机体机能具有重要作用。目前发现自然界至少存在300多种。从营养学的角度可以分为:必需氨基酸、半必需氨基酸以及条件必需的氨基酸、非必需氨基酸。作为机体内第一营养要素的蛋白质,它在食物营养中的作用是显而易见的,但它在人体内并不能直接被利用,而是通过变成氨基酸小分子后被利用的。即它在人体的胃肠道内并不直接被人体所吸收,而是在它们的特异性的消化酶作用下,将分子较大的各种蛋白质通过水解作用分解成许多分子较小的多肽或氨基酸分子,在人和脊椎动物体内的小肠中被吸收,顺着身体的静脉进入肝脏等部位,进而为维持机体的正常生命活动提供支持。其中有一部分氨基酸分子在肝脏内合成一部分蛋白质,另一部分氨基酸分子则继续随血液循环而到达人和生物体的各个器官组织,进而合成各种人体所需的特异性蛋白质供生命体吸收利用。人体对蛋白质的需要实际上是对氨基酸的需要[3]。
2. 研究的基本内容和问题
1、枸杞蜂花粉中游离氨基酸的最佳提取工艺
影响游离氨基酸的提取因素主要有提取剂、提取方法、提取温度、时间等,由于氨基酸易溶于水,本实验主要以水作为提取剂,利用超声提取的方法,改变其他影响因素,通过正交实验法结合响应曲面从而确定最佳的提取工艺。
2、氨基酸的分析方法
3. 研究的方法与方案
1、枸杞蜂花粉中游离氨基酸的最佳提取工艺
由于氨基酸易溶于水,本实验以水作为提取剂,利用超声的方法提取枸杞蜂花粉中的游离氨基酸,以料液比、提取温度、超声功率为影响因素设计正交实验,通过茚三酮显色法检测提取液中游离氨基酸的总量,结合相应曲面确定最佳的提取工艺。
2、氨基酸提取液的纯化
4. 研究创新点
SPE固相萃取技术同传统的液-液萃取前处理方法相比,具有操作简便快速、有机溶剂用量少、分析物的回收率高等优点。近些年来,该技术已经广泛的应用于不同的样品前处理中,但被应用于枸杞蜂花粉中的游离氨基酸富集还未见报道。
5. 研究计划与进展
研究计划及预期进展
第一阶段(2016年11月):论文选题
第二阶段(2016年11-12月):查询文献资料,设计实验方案,准备实验材料
