1. 研究目的与意义、国内外研究现状(文献综述)
西藏灵菇又名雪莲菌,是源自西藏雪原的特有珍稀菌种,是由微生物所产生的乳蛋白与胞外多糖聚合而成一种胶质状乳白色的块状物,属于开菲尔中的一个品系。
藏灵菇是一种天然的发酵剂,其发酵特性优良,由于发酵过程会由于酵母菌作用引起轻微的酒精发酵,因此与普通酸奶制品有很大不同,是一种微酸,带有醇香的新型发酵乳制品。
西藏灵菇作为一种新型发酵剂,起决定性作用的菌种是乳酸菌。
2. 研究的基本内容和问题
从西藏灵菇菌粒及其发酵乳中筛选出相关乳酸菌菌种,并且选择优良产粘产酸特性的乳酸菌进行下一步发酵提取粗多糖,对粗多糖进行色谱分离纯化,测定产率并对多糖进行结构检测。
关键在于菌种的选定、鉴定以及优化多糖提取方法以提高多糖产率,为后续研究做准备。
3. 研究的方法与方案
乳酸菌胞外多糖的提取:将从西藏灵菇中筛选出的菌种接种于牛奶中首次活化24小时,二次活化16小时,每次接种量为4%,最后接种到750ml的牛奶中进行发酵24小时。
将发酵液离心(5000r,15min,4c)收集上清液,收集菌体和上清,上清加入80%三氯乙酸至终浓度4%,4c静置过夜后,离心(5000r,15min ,4c)除去蛋白沉淀。
随后将上清液悬蒸浓缩,浓缩液加入三倍体积无水乙醇,4c下静置12小时,离心(5000r,15min,4c)取沉淀,用去离子水溶解,悬蒸浓缩后透析3天,每8小时更换一次蒸馏水。
4. 研究创新点
西藏灵菇这种混合菌相发酵剂能够使发酵乳形成清爽独特的口感,而且西藏灵菇本身以及其发酵乳经证实拥有抑制肿瘤、调节胃肠道功能、调节血脂、抗氧化等功效,因此西藏灵菇发酵乳有望丰富乳制品市场。
现有的研究推测多糖是西藏灵菇发酵乳其中的主要活性成分,不仅是在西藏灵菇发酵乳的口感还是在营养上都起到了重要作用,但目前对西藏灵菇多糖的活性与理化性质的研究甚少。
eps 工业是微生物发酵生产中较新的领域,由于高粘度的特性,在设备、发酵工艺、产物提取等方面有其特殊性,需要微生物学、化学、发酵工艺学、化学工程等各个学科工作者的协作,进一步提高发酵水平和产品质量,并开发新的胞外多糖产品及扩大产品的应用范围。
5. 研究计划与进展
试验将采用以MRS培养基为主的培养方式,从藏灵菇发酵乳中分离数株乳酸菌,对分离得到的乳酸菌进行了生理生化鉴定,筛选出胞外多糖产量高的菌株进行发酵,从发酵液中提取出乳酸菌多糖进行分离纯化,然后对多糖进行相应的分析。
预计可分离出十几株乳酸菌,筛选出几株多糖产量高的菌种,并得到其产生的相应多糖的组成及一些理化特性。
