1. 研究目的与意义、国内外研究现状（文献综述）
1.1本研究的目的意义研究利用dna改组技术，对l-天冬酰胺酶基因进行分子改造。
使其热稳定性、酶活等性质改变，更适用于工业生产需求。
1.2 l-天冬酰胺酶的应用研究l-天冬酰胺酶（l -asparaginase）是一种酰胺基水解酶，能够催化天冬酰胺水解生成天冬氨酸和氨。
2. 研究的基本内容和问题
2.1 研究的目标研究l-天冬酰胺酶的基本性质，利用dna改组技术对来源于地衣芽孢杆菌的基因进行分子改造，并使其在大肠杆菌bl（de3）中表达l-天冬酰胺酶，获得提高稳定性的高活力l-天冬酰胺酶。
2.2 研究内容(1)重组菌的构建及筛选利用dna改组技术，经多次pcr，得到突变基因，分别导入表达菌株中。
经过高通量筛选，摇瓶复筛，获得活性较高的菌株。
3. 研究的方法与方案
3.1 研究方法对产酶基因经dna改组后转化感受态细胞，经筛选获得可能产l-天冬酰胺酶的菌株，通过摇瓶复筛,超声破碎获得表达产物，测定酶活。
经大量多次实验，获得能表达高稳定性高活力l-天冬酰胺酶的产酶突变菌株。
3.2 技术路线将目的基因片段化片段化dna序列进行重组，载体连接96孔板初筛摇瓶复筛突变株酶学性质研究3.3 实验方案3.3.1 对地衣芽孢杆菌产l-天冬酰胺酶基因处理，建立突变文库以实验室已有的基因（来源于地衣芽孢杆菌）为目的dna片段，将其片段化后进行pcr延伸，获得重排产物的集合，称为突变文库3.3.2 突变基因导入表达菌株，筛选导入成功的表达菌株将突变基因与表达载体重组，导入感受态细胞，并涂布于含有kana的固体培养基上。
4. 研究创新点
4 特色或创新之处L-天冬酰胺酶的研究受到广泛关注，根据工业食品生产需求，通过DNA改组技术获得符合要求的新型L-天冬酰胺酶产生菌。
利用已经初有成效的DNA改组技术，在已有研究成果的基础上，对L-天冬酰胺酶进一步改造。
5. 研究计划与进展
5 研究计划及预期进展5.1 研究计划2016.9.1-2016.10.1阅读相关文献，拟定实验方案2016.10.1-2016.11.15进行小批量的预实验，总结实验中遇到的问题，查阅文献思考可能的解决方案，完成文献综述2016.11.16-2017.1.15有序地进行实验，做好实验记录，对于实验过程中遇到的问题进行分析思考，提出解决方案并继续进行后续实验，建立突变文库。
2017.2.20-2017.4摇瓶发酵，寻找L-天冬酰胺酶活力高的菌株2017.5 -2017.5.20补充实验，撰写毕业论文2017.5.26 毕业答辩5.2 预期进展2016.10 实验方案（初稿）定稿2016.11 初步预实验2017.4 筛选得到L-天冬酰胺酶活力高的菌株2017.5 撰写毕业论文，毕业答辩结束
