微生物高效积累中链脂肪酸的合成途径优化开题报告

1. 研究目的与意义、国内外研究现状（文献综述）

脂肪酸甘油酯是一种功能性油脂在食品、化妆、工业、营养、医药等领域得到广泛应用。在医疗上，中链脂肪酸甘油三酯是控制人体肥胖的有效类脂物，可以限制人体组织中胆甾醇沉淀^[1]；可以提供人类迅速吸收的高能量营养，使肠切除的病人迅速获得热能补充^[2]。在化妆行业上， 甘油辛癸酸酯能被皮肤吸收，具有乳化稳定作用和抗氧化作用，可以使化妆品均匀细腻，使皮肤润滑有光泽，在护发产品中，可以使头发柔顺发亮^{[3] [4]}。在食品行业上，中链脂肪酸甘油三酯具有调节食品口感和质地的作用，用在运动食品中，可以迅速恢复运动员的体力，缓解运动后的疲劳感^[5]，欧盟、美国、日本等国均已通过食品安全检测，在市场上有良好的销售状况^[6]。

国内外研究概况：

现阶段大多数的研究都集中在长链脂肪酸，并且微生物中长链脂肪酸的产量高于中链脂肪酸，这是因为长链脂肪酸是构成细胞壁完整性的重要因素^[7]；此外，脂肪酸的提取困难也是限制脂肪酸研究的因素，脂肪酸细胞内分泌物，必须经过分离提取才能从发酵液中获得，这不仅提高了脂肪酸提取的成本，也降低了脂肪酸的收集量^[8]。因此，中链脂肪酸的研究仍处于较低的水平。

2. 研究的基本内容和问题

研究目标

1）检测关键步骤

为了使大肠杆菌能合成c₆-c₁₂的中链脂肪酸，途径选择的合成途径关键酶，分别为来自罗尔斯通氏菌基因bktb表达的硫解酶、来自大肠杆菌基因fadb表达的3-羟酰基辅酶a脱氢酶、 3-羟酰基辅酶a脱水酶、来自薄肌眼虫基因egter表达的反式烯酰辅酶a还原酶和来自大肠杆菌基因ydii表达的硫脂酶， 找到其中的一个或多个关键步骤。

3. 研究的方法与方案

研究方法、技术路线、实验方案及可行性分析

研究方法：

1）检测关键步骤

4. 研究创新点

特色或创新之处

1、目前，国内对于长链脂肪酸的研究很多，但对于中链脂肪酸的研究和报道都相当少，所以选取中链脂肪酸的合成途径优化比较具有特色。

2、对于中链脂肪酸的合成途径优化，我们所采用的是基因定量的方法探究实验途径中的关键步骤和关键基因，优化脂肪酸合成途径，具有一定的创新。

5. 研究计划与进展

研究计划及预期进展

2015年10月01日-10月10日 论文选题，资料收集、整理、总结分析

2015年10月10日-10月20日 实验的设计