1. 研究目的与意义、国内外研究现状（文献综述）
本课题主要以糖生物学和糖组学研究为背景。
糖生物学是近二十余年来生物化学领域发展最为迅速的学科之一，这一概念最早由牛津大学德威克教授提出。
作为生命体内最重要的三种化学物质（糖，蛋白质，核酸）之一，糖分子参与构成了大量蛋白质的修饰组分，并以糖蛋白的形式在细胞结构，细胞分化，信号转导，细胞免疫和细胞识别等生理代谢方面发挥重要的作用，而糖生物学的主要内容则是研究生物体内糖的生化结构与性质、糖蛋白中糖分子的作用与功能及糖与蛋白质之间的相互作用等。
2. 研究的基本内容和问题
当前，用生物酶工程技术合成糖链是糖科学领域最热门的研究课题之一，受限于底物产品UDP-GlcA产量过低，成本太高等因素，核苷酸糖的合成研究尚处于起步阶段，仅有屈指可数的寡糖化合物合成研究成果被发表，且都在小规模的生产水平。
因此，在这一研究方向里，核苷酸糖的酶法合成便成为最关键的突破口，而UDP-GlcA的合成依赖于酶蛋白UGD对底物UDP-Glu的转化作用，本课题拟针对UDP-GlcA的有效酶法合成为目的，以生物信息学、基因克隆、蛋白质表达，酶的分析鉴定等现代分子生物学和生物化学技术手段，寻找和开发更好更有应用价值的UGD酶基因，并对其生化特征如酶活力指标、底物特异性、金属离子对酶活的影响、竞争剂和抑制剂对酶活的影响等进行鉴定，同时尝试将其应用于UDP-GlcA的合成反应中去，并对其反应条件进行初步摸索和优化。
3. 研究的方法与方案
1、 研究材料：微生物菌种am（akkermansia muciniphila） 2、方法和手段：（1）从kegg，ncbi等数据库中查找udp-glca的生物合成通路，并找到ugd的基因序列，该微生物菌种akkermansia muciniphila的基因组序列，进而通过同源比对搜索的方法找到amugd。
（2）提取该微生物的基因组dna，用pcr技术扩增amugd并构建其原核蛋白表达载体，经测序验证序列无误后，在大肠杆菌中进行蛋白质表达及纯化。
（3）对经原核表达并纯化后的amugd蛋白进行各项生化指标的分析，如sds-page蛋白电泳分析，酶活力及km值的鉴定，酶的最适温度、ph范围的检测等。
4. 研究创新点
1、首次克隆、表达和鉴定了Akkermansia muciniphila源UDP-葡萄糖脱氢酶。
2、首次以糖生物工程应用视角对UDP-葡萄糖脱氢酶进行发掘和研究。
5. 研究计划与进展
2016年2月研究对象的基因克隆、载体构建（目的基因导入质粒)、目的基因扩增、测序（质粒导入大肠杆菌） 2016年3月蛋白表达、纯化 2016年4月酶学特性分析，整理资料和数据，撰写研究报告，准备课题验收
