1. 研究目的与意义、国内外研究现状(文献综述)
本课题的意义:
多酚类化合物是植物的次生代谢产物,广泛存在于食物中,包括黄酮类化合物、咖啡酸、绿原酸等。许多研究报道表明,摄入富含多酚类化合物的饮料、水果和蔬菜可以减缓肥胖、心血管疾病、糖尿病等慢性疾病甚至癌症的发生和发展。很大一部分原因在于其中的多酚类化合物具有抗氧化、抗病菌、增强免疫力、参与营养成分代谢调节的生理活性。然而,大部分多酚类化合物,如苦丁茶多酚存在口服后生物利用度不高,在肠道的吸收机制仍不明确的问题,本课题结合近年来国内外的研究概况,对苦丁茶多酚进行提取,再通过体外模拟口腔、胃、小肠的消化环境,研究苦丁茶多酚在上述各环境中的消化情况,进行苦丁茶多酚的体外代谢研究,从而为提高苦丁茶多酚类化合物口服后的生物利用度提供一定的理论指导作用。
国内外研究概况、应用前景:
2. 研究的基本内容和问题
研究目标:
(1) 体外模拟口腔、胃、小肠的消化环境,明确苦丁茶多酚的体外代谢情况。
(2) 为提高苦丁茶多酚类化合物口服后的生物利用度提供理论指导。
3. 研究的方法与方案
研究方法
利用离子交换柱分离大叶冬青苦丁茶中苦丁茶多酚,在通过蒸发、干燥获得多酚粉末,再通过体外模拟口腔、胃、小肠的消化环境,研究苦丁茶多酚在上述各环境中的消化情况,进行苦丁茶多酚的体外代谢研究。
技术路线
苦丁茶的处理 |
苦丁茶多酚的制备 |
液相色谱分析 |
模拟口腔液、胃液、小肠液的制备 |
多酚在模拟液中的消化 |
实验方案
1、 样品的制备
称取一定量粉碎过筛的苦丁茶冬青苦丁茶粉末,按料液比1 ∶ 10加入沸水,并于95 ℃水浴中浸提30 min,过滤,取苦丁茶水备用。苦丁茶冬青苦丁茶水提物经过HP-20大孔树脂吸附后,先后用2 个柱床体积(BV)的水和70%乙醇洗脱,乙醇洗脱组分浓缩冻干即为苦丁茶多酚。
2、 多酚在模拟液中的消化
2.1多酚在口腔液中的代谢
取一定量的苦丁茶多酚溶液,在模拟口腔液条件下分别作用 0、10、30、60、120min,并分别进行液相色谱分析,研究其代谢情况。
2.2多酚在胃液中的代谢
取一定量的苦丁茶多酚溶液,在模拟胃液条件下分别作用 0、30、60、120、180、240min,并分别进行液相色谱分析,研究其代谢情况。
2.2多酚在小肠液中的代谢
取一定量的苦丁茶多酚溶液,在模拟小肠液条件下分别作用 0、30、60、120、180、240min,并分别进行液相色谱分析,研究其代谢情况。
可行性分析
(1) 研究理论可行:国内外已有许多学者涉及多酚代谢的研究,可以为本研究提供理论指导。
(2) 研究方法可行:本实验室针对苦丁茶多酚做了大量的研究工作,积累了丰富的实验经验。如研究苦丁茶冬青苦丁茶提取物与3,5-双咖啡酰奎尼酸对肠道微生物体外发酵的影响。
(3) 研究力量可行:项目研究人员来自生物工程专业,已学习许多生物化学方面的课程专业课程,具备了相关理论基础和实验技能。指导老师长期从事相关领域研究,能提供很好的理论指导。
4. 研究创新点
特色或创新之处
苦丁茶多酚存在口服后生物利用度不高,在肠道的吸收机制仍不明确的问题,国内外针对苦丁茶多酚在体外模拟消化方面的研究较为鲜见,本课题结合近年来国内外的研究概况,对苦丁茶多酚进行提取,再通过体外模拟口腔、胃、小肠、大肠的消化环境,研究苦丁茶多酚在上述各环境中的消化情况,进行苦丁茶多酚的体外代谢研究,从而为提高苦丁茶多酚类化合物口服后的生物利用度提供一定的理论指导作用。
5. 研究计划与进展
研究计划
2015.10-2015.12 多酚样品的制备
2016.01-2016.04 研究多酚在体外模拟液中的代谢情况
