FABP心肌型脂肪酸结合蛋白作为急性心肌梗塞早期诊断试剂盒研制开题报告

 2022-01-29 18:49:34

1. 研究目的与意义、国内外研究现状(文献综述)

急性心肌梗死(acutemyocardialinfarction,ami)是冠状动脉急性闭塞,冠状动脉血流中断,心肌细胞处于长时间持续缺血缺氧状态,从而导致的局部心肌急性坏死。急性心肌梗死起病急,病程危险,预后极差,其发病率和死亡率在世界范围内居高不下,严重威胁着人类的健康与生命。

早期采取有效治疗措施可以显著降低急性心梗死亡率,改善预后。而早期治疗有赖于对急性心梗的早期诊断。心肌梗死最常见的症状是急性严重的胸痛,但也有一定比例的临床未识别的心梗。约25%的心肌梗死没有症状,只是在急性事件后,通过心电图的q波的特点或超声心动心室壁运动异常而发现。心脏病的诊断除临床症状和体征外,主要靠医学检测技术。

其中,心肌损伤生化标志物检测在急性心肌梗死(ami)早期诊断中扮演着不可或缺的角色,目前临床常用的心肌损伤生化标志物有心肌型激酸激酶同工酶(ck-mb)、肌钙蛋白(ctn)和肌红蛋白(myo)。ck-mb和ctn对ami特异性好但出现稍晚;myo虽然在ami早期即可升高但其心肌特异性较差。基于上述原因,现有的生化标志物在早期诊断ami的应用上受到一定限制。

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2. 研究的基本内容和问题

目标:研制出心肌型脂肪酸结合蛋白h-fabp作为急性心肌梗塞早期诊断检测指标的试剂盒并能满足现在临床快速、准确、简便的要求。

内容:采用双抗体夹心法,以固相免疫层析形式为载体,研制出检测人血中h-fabp为急性心梗早期诊断指标的试剂盒。

拟解决的问题:

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3. 研究的方法与方案

研究方法:用双抗体夹心法半定量检测h-fabp

技术路线:胶体金免疫固相层析技术

实验方案: 将抗h-fabp抗体1包被在硝酸纤维素膜上,将胶体金标记的抗h-fabp抗体2结合在聚酯膜上,将样本滴加一定量到加样端上,样本由毛细作用力上行,将金标抗体2复溶,形成金标抗体-抗原复合物,复合物随样本扩散到硝酸纤维素膜上,被包被有抗h-fabp抗体1的区域拦截,形成胶体金标记抗体-抗原-包被抗体的免疫复合物,即产生清楚信号一条红线。

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4. 研究创新点

1.灵敏度高,可测到1.56ng/ml;

2.测量快速,低值样本10min可出结果,高值样本1min即可出结果;

3.操作简便,不需要复杂设备;

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5. 研究计划与进展

2014.12-2015.1阅读文献、了解胶体金免疫层析技术等基本实验方法

2015.3-2015.4.调整抗体浓度,优化反应体系中各类物质的种类和配比

2015.4-2015.5检测卡特异性、灵敏度、精密性、稳定性、准确度和检测范 围的确定和考核。

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