重组漆酶fb820的制备和应用探究开题报告

1. 研究目的与意义、国内外研究现状（文献综述）

1、研究意义

染料工业是国民经济中的重要行业，其生产的染料被广泛应用于纺织、造纸、食品、皮革、化妆品、涂料、油漆、油墨、电子工业等各个领域。染料品种数以万计，在生产和使用过程中大约有10%~20%的染料会直接随废水进入环境中^[1]。目前我国各种染料产量已达90万吨，染料废水已成为环境重点污染源之一。染料行业品种繁多，工艺复杂。其废水中含有大量的有机物和盐份，具有codcr高，色泽深，酸碱性强等特点，一直是废水处理中的难题。

在目前的染料废水处理中常见的方法主要有物理法、化学法、电化学法、生化法等。物理和化学的处理法虽然对废水色度去除率较高，但cod去除率较低，且存在处理费用高、还有可能引起污染等问题。生物法即通过筛选或构建具有高效性能的特定微生物菌株用于染料废水的脱色，是一种经济、有效且适于大规模废水处理的技术^[2]。

2. 研究的基本内容和问题

1、研究目的

1) 了解并操作重组漆酶的实验室制备流程；

2) 探究重组漆酶fmb-820对染料的脱色效果。

3. 研究的方法与方案

1、研究方法与方案

1) 重组芽孢漆酶的诱导发酵培养

取100μl保藏的重组芽孢漆酶fmb-l820,接种于含有100μg/ml氨苄卡青霉素的液体lb培养基中，37℃，180rpm过夜培养14h。再取出4ml种子液到400ml液体lb培养基中，37℃，180rpm培养到od₆₀₀=0.6为0.6左右，加200μl iptg（200mg/ml）和过膜的25mmol/l cu² 2ml，16℃诱导16h。

4. 研究创新点

重组芽孢漆酶fmb-820是本实验室筛选出来的酶，生长周期短，生长温度和pH范围广，可提高生产效率，研究其对染料的脱色作用，具有一定的实际应用价值。

5. 研究计划与进展

第一阶段（2013.10），重组漆酶fmb-820的制备和冷冻干燥

第二阶段（2013.11），探究ph、介体和反应时间等因素对重组漆酶fmb-820脱色效果的影响

第三阶段（2013.12），重组漆酶fmb-820对染料脱色效果的探究。