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1. 研究目的与意义
鹅掌楸是非常重要的珍稀物种,它树形美观、叶形奇特、花大鲜艳、因此是一种重要的绿化树种。鹅掌楸成年后树体高大,也是用于造林的不错选择。据报道,北美鹅掌楸木材大量用作装饰材、工业胶合板面材或芯材、造纸等,也说明鹅掌楸是较好的用材树木。虽然鹅掌楸有众多优点,但由于其结实率很低,已成为孑遗植物。现从杂交鹅掌楸中克隆出HD-ZIPIII基因进行研究,构建表达载体,并进行拟南芥的遗传转化,从而对该类转录因子进行初步分析。根据转化成功的拟南芥的表型,来了解HD-ZIPIII转录因子的基础功能,进而阐明该类因子在鹅掌楸中的功能。这有利于实现人为调控鹅掌楸的性状,并为鹅掌楸育种提供资源。
2. 国内外研究现状分析
经研究已证明,HD-ZipIII在植物多种细胞分化过程都起到重要调控作用,如胚胎形态发生、分生组织发育、叶的极性建立和维管系统发育等。而这类转录因子的表达又受多种因子调控:microRNA、植物激素(生长素)、KANADI类转录因子等等。掌握HD-ZipIII类转录因子的作用及调控机理,有可能实现人为控制植物性状,这对育种工作具有重要意义。
3. 研究的基本内容与计划
本研究是以通过同源克隆方法,从杂交鹅掌楸中获得的hd-zipiii家族基因为材料,将构建好的过表达载体35s:lhhb9和35s:lhrev通过农杆菌介导花序浸泡法进行遗传转化,将目的基因转入野生型拟南芥。并通过抗生素筛选和分子生物学方法进行验证,获得阳性转基因植株。观察记录阳性转基因植株的生长发育情况,进行统计分析,进一步分析杂交鹅掌楸lhhb9,lhrev基因的功能。具体研究内容:1、将杂交鹅掌楸hdzipiii家族 基因遗传转化入农杆菌2、将35s: hdzipiii 目的基因转化拟南芥,筛选获得阳性转基因植株。3、对阳性转基因植株进行表型观察,数据统计及分析。4、根据观察所得数据进行分析,重点观察维管组织及叶片结构的差异;注意植株高度、茎段粗细数据的收集,对收集的生长数据等进行统计分析,数据结果以图片和表格的形式表现,得出可靠结论。
具体时间安排:
2016/2/1-2016/3/1:查阅文献,完成开题报告
4. 研究创新点
本研究在了解HD-zipIII类转录因子作用的前提下,立足于植物基因克隆的基础操作,以野生型拟南芥(哥伦比亚,col)为受体,进行基因的遗传转化,在实现转化后,对试验材料进行观察并收集数据,最终进行统计分析。
本研究对于进一步了解HD-Zip III转录因子的结构及其生理功能,植物发育和细胞分化的基因调控机制,全面了解植物HD-ZipIII转录因子功能和活性的调节机制等提供线索,对揭示植物维管的发育机制,以及利用植物作为能源的材料都有重要意义,并探讨其在林木育种中的重要应用价值。
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