银杏外种皮酚酸粗提物的抑菌性研究开题报告

1. 研究目的与意义

银杏酚酸具有抗氧化、抗炎、抗肿瘤、抗过敏、抑菌、防治病虫害等作用，在化妆品、生物农药和医药方面有很好的应用价值。但由于种种原因，银杏酚酸类物质的开发利用还是比较欠缺，产品更是稀少，致使银杏外种皮等资源得不到很好的利用。在产区，种植者往往将大量剥离下来的银杏外种皮扔之山沟或河里，不仅毒死鱼虾，而且气味难闻，造成严重的环境污染。为此，如何开展银杏外种皮资源的合理利用，治理污染，改善环境，是促进银杏进一步产业化工作中的一项迫切任务。

本实验以银杏外种皮为实验材料，应用几种常规试剂浸提，并进一步萃取分离；将提取物对选用的几种菌做抑菌实验，以抑菌性的效果为评价指标，选出抑菌效果较好的浸膏，为银杏外种皮抑菌剂的开发利用提供理论指导，促进银杏外种皮的开发利用。

2. 国内外研究现状分析

见附页

3. 研究的基本内容与计划

一研究内容

1.抑菌活性物质

银杏外种皮六种不同极性溶剂粗提物；

最强抑菌粗提物的五种不同极性溶剂萃取物。

2.菌种的培养及抑菌效果测定

2.1菌种的选择

选择广谱的菌种，如金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌、大肠杆菌、沙门氏杆菌、黑霉菌、小麦赤霉病菌、稻瘟病菌、白菜黑斑病菌几种病菌作为供试菌种。

2.2培养基的配制

培养细菌牛肉膏蛋白胨培养基

牛肉膏 3g；蛋白胨 10g；NaCl 5g；琼脂 15-20g；水 1000ml；PH 7.0-7.2。

培养真菌马铃薯葡萄糖培养基

马铃薯 200g；葡萄糖 50g；琼脂 15-20g；水 1000ml；PH 自然。

马铃薯去皮，切成小块煮沸0.5h，用纱布过滤，再加糖及琼脂，溶化后补足水至1000ml。

2.3抑菌效果的测定

采用含毒培养基生长速率法，测定提取物的抑菌效果。

2.4最小抑菌浓度（MIC）确定

	培养基（mL）	药物原浓度 100mg/ml	药物最终浓度 mg/ml	菌种 1106cfu/ml
1	1	吸取药液1mL	25	加入1ml，最终菌浓度5105cfu/ml
2	1	吸取1号1mL	12.5
3	1	吸取2号1mL	6.25
4	1	吸取3号1mL	3.125
5	1	吸取4号1mL	1.56
6	1	吸取5号1mL	0.78
7	1	吸取6号1mL	0.39
8	1	吸取7号1mL	0.195
9	1	吸取8号1mL	0.098	无菌
10	1	含菌种不含药物

1~10号均设置对照组，对照组不添加1mL菌悬液，添加1mL无菌水，其余与对应号试管相同。

3.抑菌效果信息采集及分析

二.研究计划

1）2012.2.203.2实验准备阶段：查阅有关实验资料，明确实验原理和工艺，写出开题报告和文献综述等材料。

2）2012.3.3 4.20 正式实验阶段：根据实验方案，进行实验，记录实验步骤和数据。

3）2012.4.205.20 数据处理阶段：整理数据，并计算得出结论，根据结论写论文，论文答辩。

4. 研究创新点

国内外研究银杏外种皮酚酸粗提物的抑菌性研究虽然不少，但将之开发到实际生产中的却不多，而本实验就对应几种常见病菌进行抑菌性实验，并将粗提物所对应的最佳抑制的病菌种类找出，更找出最小抑制浓度，为银杏外种皮粗提物抑菌剂的研制提供依据。