土壤中真菌分离鉴定研究进展开题报告

1. 研究目的与意义、国内外研究现状（文献综述）

本课题的意义、国内外研究概况、应用前景等（列出主要参考文献）真菌 　大多为多细胞生物，部分为单细胞生物。

个体较大，呈分枝状丝菌体,细胞直径3～50微米。

土壤中常见的真菌有青霉(penicillium)、曲霉(aspergillus)、镰刀菌 (fusarium)和毛霉(mucor)等属。

2. 研究的基本内容和问题

研究的目标、内容和拟解决的关键问题研究的目标：1从土壤中筛选出真菌、细菌等微生物；2用分子生物学方法将其鉴定到种；3筛选高产有益成分的微生物；4、学习从土壤中微生物分离、纯化的原理与方法；5、学习、掌握微生物的鉴定方法；6、对提取的土样进行微生物分离、纯化培养，根据特定区域基因序列以及菌落形态特征判断未知菌的类别。

研究的内容：土壤中的微生物分离、鉴定以土壤为研究对象，梯度稀释后涂布于不同培养基上，经划线三代纯化得到微生物纯培养物。

提取微生物dna，通过pcr扩增16s rdna、its等区域序列，pcr产物经琼脂糖凝胶电泳纯化，ta克隆后,测序，测序结果在ncbi数据库中进行比对，绘制系统发育树，结合形态学特征及生理生化指标对微生物进行鉴定。

3. 研究的方法与方案

研究方法、技术路线、实验方案及可行性分析研究方法：1、培养基配置：真菌用培养基，即孟加拉红培养基（1l）：葡萄糖 10.0g、1/3000 孟加拉红水溶液 100ml、蛋白胨 5.0g、kh2po4 1.0g、琼脂 18g、mgso4 .7h2o 0.5g、去离子水 900ml。

pda固体培养基：（g/l）:葡萄糖200g、琼脂 20g、食指、30g。

lb（luria-bertani）培养基：胰蛋白胨 10.0 g、酵母浸出粉 5.0 g、na cl 5.0 g，琼脂 15g，蒸馏水 1000 m l，p h 7.0。

4. 研究创新点

本项目以具有丰富的新疆伊犁地区土壤微生物土壤内微生物的种类,数量,分布都受环境因素的影响,因此,我们对新疆不同地区微生物分布作了调查,初步了解了不同地区土壤微生物的分布情况,对进一步开发利用有应用前景的微生物品种有很大意义。

土壤微生物的种类繁多,在土壤物质转化中具有多种重要作用,与土壤肥力和植物营养有着密切的关系,同时又是工业、农业、医学有用菌种的丰富资源。

5. 研究计划与进展

第1-3周：确定课题并收集实验资料第4-5周：准备开题报告，熟悉开题的相关环境及条件第6-10周：具体实验和调试，实验工艺参数及流程等第11-12周：进行完善和修改，整理说明书，撰写答辩材料。