1. 研究目的与意义
酶固定化是用物理的或化学的方法使酶与水不溶性大分子载体结合或把酶包埋在其中,使得酶的流动性降低。
酶固定化后稳定性增加,易从反应系统中分离,且易于控制,能反复多次使用,同时增强了酶的使用效率,延长了酶的使用期限,便于运输和贮存,有利于自动化生产。
而游离酶在水溶液中很不稳定,游离状态的酶对热、高离子浓度、强酸、强碱及部分有机溶剂等稳定性较差,容易失活,纯化困难,不能重复使用等缺点。
2. 研究内容和预期目标
本实验采用国药集团化学试剂有限公司的壳聚糖和海藻酸钠作,对磷酶进行固定化实验,并通过测定比较,酶和固定化酶在不同条件范围内反应的情况。
本实验的关键问题是研究固定化木瓜蛋白酶和酶的最佳反应条件,以温度、底物浓度、反应时间这几个因素,以游离酶活为指标,进行实验。
3. 国内外研究现状
固定化酶是近年代以来迅速发展起来的一项新技术。
我国的固定化酶的研究始于1970,首先是中国科学院微生物所和上海生化所的酶学工作者同时开始的研究。
固定化方法可分为吸附法、包埋法、共价键结合法、肽键结合法、交联法。
4. 计划与进度安排
第一部分:海藻酸钠、壳聚糖固定化磷脂酶的制备。
第二部分:游离磷脂酶实验,以温度,底物浓度,反应时间为因素,以游离酶活为指标,进行实验。
第三部分:海藻酸钠、壳聚糖固定化磷脂酶的实验,以温度、底物浓度、反应时间为因素,以固定化酶活为指标进行实验。
5. 参考文献
[1]陈建龙,祁建城,曹仪植,郭勇,段惠丽.,固定化酶研究进展[j].化学与生物工程,2006,2:7-9.
[2]胡和兵,王牧野,吴勇民,何明中 酶的固定化技术及应用 [j] china brewing 2006.7 no.160
[3]姜涌明,绥德新,赵国骏,史永昶,施伟 壳聚糖固定化木瓜蛋白酶的研究 [j]生物化学杂志 1993.89(4)470~474
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