1. 研究目的与意义、国内外研究现状(文献综述)
人参是我国名贵的中药材,人参多糖是其中主要有效活性成分之一。
近年研究表明,人参多糖可明显增强免疫系统的功能,还有抗肿瘤、抗氧化衰老以及防辐射等多种功效。
而且人参制剂的毒性很低,对机体均无明显毒性。
2. 研究的基本内容和问题
研究目标:本实验通过应用不同的方法从人参花中提取出多糖类物质,然后配制浓度梯度使其分别作用于amm、hela、mcf、hgc四种肿瘤细胞。
通过数据观察与分析得出不同浓度多糖对同种细胞增殖的相关性、差异性以及规律性,并且分析概括浓度和提取方法的组合对四种细胞增殖的影响作用。
研究内容:人参花多糖是通过碱提、水提以及过柱子的方法提取,将不同方法提取的人参花多糖分别配制成1000ug/ml、500ug/ml、200ug/ml、100ug/ml以及50ug/ml五种不同浓度的溶液。
3. 研究的方法与方案
研究方法:本实验通过用不同方式提取的人参花多糖按照浓度梯度去作用于不同肿瘤细胞,之后分析其抑制率得出结论。
技术路线和实验方案:实验所用的肿瘤细胞经过复苏后进行传代培养,当其生长进入对数期时,开始用多糖溶液去培养,因为细胞生长速度快,用多糖溶液培养24h后再用mtt法对细胞数进行检测并得出数据,计算得出不同浓度的多糖对肿瘤细胞增殖的影响。
可行性分析:人参多糖的研究迄今为止已有多年历史,且其免疫调节功能、抗肿瘤、抗氧化衰老、防辐射等多种功效早已熟知。
4. 研究创新点
迄今为止,对于人参花的研究主要以人参皂甙为主,有关人参花多糖的报道还在少数,本实验选择研究人参花多糖的活性为一大亮点;其次,人参花多糖的分离纯化虽已有人研究,但将不同方式提取的人参花多糖分别作用于不同的肿瘤细胞,这点还在少数;再次,本实验中选取的肿瘤细胞,如宫颈癌细胞、等都是全世界人民的健康杀手,且每年死于这些疾病的人不在少数,所以,实验细胞的选取也是一大特色;将多糖配制成浓度梯度再作用于细胞,再做出图表,通过图表可观察出最佳抑瘤作用的浓度范围,这样为以后的实验者提供了一个小的范围去研究最佳抑瘤浓度,这是第四大亮点。
5. 研究计划与进展
首先将冻存的细胞取出复苏后进行传代培养,传代培养两三次后即可开始实验。
一次传代大概时间为两天。
人参花多糖提前提取好,在细胞培养开始前配制好其浓度梯度。
