1. 研究目的与意义、国内外研究现状（文献综述）
目前, 利用丝状真菌生产微生物油脂的研究很多, 丝状真菌中含有丰富的多不饱和脂肪酸( pufa s) , 多不饱和脂肪酸主要是指亚油酸( la) 、α-亚麻酸(ala)、γ-亚麻酸( gla) 、花生四烯酸( ara ) 、二十碳五烯酸( epa) 和二十二碳六烯酸( dha) 等，这些多不饱和脂肪酸已被证实的生理功能有诸如治疗和预防高血压、心脏病和某些癌症, 改善糖尿病并发症，降低胆固醇，降血脂，抗动脉粥样硬化作用，抗菌、抗hw作用，对类风湿性关节炎、肠炎、脉管炎、肾炎等多种炎症均具有疗效或改善作用，此外还具有改善记忆力和睡眠效果，减肥等等重要的保健功能还有美容、化妆品方面的应用，其中有些不饱和脂肪酸是大脑和神经系统不可缺少的营养物质, 是大脑发育过程中的必需脂肪酸。由于多不饱和脂肪酸油脂在陆地动植物中含量较少, 一般在月见草、夜来香中可以提取gla,在深海鱼油中制取epa和dha, 目前多不饱和脂肪酸油脂产品的主要原料来源是深海鱼油, 其稳定性差, 且受季节、产地等因素影响, 因此价格比较昂贵。而微生物油脂可克服上述缺点, 它不受季节影响, 质量较为稳定, 生产期短, 精制成本低, 可进行大规模生产。随着人口的增多和资源的不足, 利用微生物来合成脂肪酸油脂变得越来越受人们瞩目, 这方面的研究已成为近年来的一个热门课题。产油微生物具有资源丰富、油脂含量高、碳源利用谱广等特点,开发潜力大,所以微生物油脂具有良好的发展前景,开辟微生物油脂这一新的油脂资源的研究开发领域将是工业化生产油脂的一个重要途径。
[1] 郭良栋. 内生真菌研究进展[j]. 菌物系统, 2001,20(1):148-152.
[2] 赵晓燕, 马越. 亚麻酸的研究进展[j]. 中国食品添加剂, 2004(1):27-29.
2. 研究的基本内容和问题
随着人口的增多和资源的不足, 利用微生物来合成脂肪酸油脂变得越来越受人们瞩目, 这方面的研究已成为近年来的一个热门课题。产油微生物具有资源丰富、油脂含量高、碳源利用谱广等特点,开发潜力大,所以微生物油脂具有良好的发展前景,开辟微生物油脂这一新的油脂资源的研究开发领域将是工业化生产油脂的一个重要途径。丝状真菌油脂含量高，且油脂中的 γ-亚麻酸、花生四烯酸等功能性多不饱和脂肪酸含量较酵母菌、细菌和藻类生产的油脂含量更高，因而被越来越广泛深入地研究。小克银汉霉菌发酵产物由菌体干重、油脂含量几部分共同决定, 一个因素的提高却可能导致最终产量下降, 因而对其发酵条件要全面考虑。
本研究主要以一株编号为Salicorn 5小克银汉霉菌为研究对象（是于野生盐生海芦笋中分离到的一株产油内生真菌），以油脂产量和生物量为研究指标，利用单因素实验对其发酵参数进行筛选, 包括考察不同发酵天数、C/N、无机盐离子等参数对小克银汉霉产油脂的影响；该研究旨在提高产油真菌Salicorn 5的生物量和油脂产量。
3. 研究的方法与方案
实验方案1 菌种活化 在无菌条件下，从实验室保藏的固体斜面培养基用接种环刮取菌体，接种于121℃经过30min灭菌后的pda平板培养基中, 经28℃培养3d活化。将斜面培养物放置4℃ 下冰箱中保存。
2 发酵培养 在无菌条件下，将活化后的菌种接种至装有100ml发酵培养基的500ml三角瓶中，每瓶接种两到三次，接种后在28℃、120r/min的条件下摇床培养。
3 发酵天数对油脂产量的影响 改变发酵天数，分别以3d、4d、5d、6d、7d培养，考察不同发酵天数对油脂产量、生物量的影响，确定油脂产量最大的天数。
4. 研究创新点
特色 本次实验就是以真菌2号发酵培养基为出发点进行优化研究。根据真菌的不饱和脂肪酸合成途径，GLA等合成是从乙酰CoA开始合成饱和脂肪酸，再由饱和脂肪酸脱饱和而形成的。乙酰CoA主要来自外源碳源的氧化分解，因此碳源选择很重要。而研究表明，以葡萄糖为碳源，油脂产量及油脂转化率均达到最大，由此说明葡萄糖是小克银汉霉合成油脂的最佳碳源。有实验表明，有机氮源酵母膏有利于油脂合成，其脂肪系数较无机氮要大，氨基酸含量丰富，利于细胞的生长；玉米浆含有丰富的营养物质，特别是各种氨基酸、营养因子以及磷等微量元素，是发酵工业中最常用的营养添加物，有利于合成单不饱和脂肪酸，它既可以在生长初始阶段作为氮源来促进菌丝体生长, 也可以在生长后期作为氮源来促进胞内代谢产物的积累。味精则是作为主要氮源来源。
5. 研究计划与进展
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