酶法催化高效合成阿斯巴甜前体Z-AMP开题报告

1. 研究目的与意义（文献综述包含参考文献）

文 献 综 述 1. 蛋白酶研究概况按照国际酶学委员会（iec）的命名规则，蛋白酶属于第三大类水解酶类的第四亚类肽水解酶或肽酶（ec3.4），与淀粉酶、脂肪酶、磷酸酶等同属于一大类家族。

按照不同的分类标准，可以将数量众多的蛋白酶分为不同的类别。

蛋白酶按照其水解催化底物的位点，可以总体分为外切酶和内切酶，其中前者是从肽链的氨基端或羧基端开始水解切割肽键，而后者则从肽链中间特殊的肽链位点将底物裂解成小片段；依据蛋白酶的来源不同，可以将其分为动物、植物和微生物蛋白酶；高温蛋白酶的概念则是根据酶的最适催化温度来进行分类的，通常可以分为低温蛋白酶(-2℃~20℃)、中温蛋白酶(20℃~55℃)、高温蛋白酶或者称嗜热酶（55℃~80℃）以及超级嗜热蛋白酶（80℃~113℃）[1]；根据蛋白酶的ph作用范围，研究人员又将蛋白酶划分为碱性蛋白酶、中性蛋白酶和酸性蛋白酶；基于蛋白酶的活性中心和必须基团的特点，它们大部分可以被划分为四类，分别是丝氨酸蛋白酶（s），图1-1为丝氨酸蛋白酶作用机理，在丝氨酸蛋白酶催化过程中丝氨酸上的羟基与底物结合，形成中间过渡态，丝氨酸蛋白酶主要有枯草杆菌蛋白酶、胰蛋白酶、胰凝乳蛋白酶和弹性蛋白酶，天冬氨酸蛋白酶（a）。

2. 研究的基本内容、问题解决措施及方案

为进一步拓展蛋白酶在催化领域中的应用，本课题主要通过定点突变技术，通过与嗜热蛋白酶进行对比分析，定点的改造本实验室具有自主知识产权的耐有机溶剂蛋白酶pt121。

使得改造后的耐有机溶剂蛋白酶pt121突变体在催化合成阿斯巴甜时具有更高的催化效率。

本课题以苄氧羰基天冬氨酸（cbz-l-asp）和苯丙氨酸甲酯盐酸盐（pheome.hcl）为底物，合成苄氧羰基阿斯巴甜(cbz-apm)。