1. 研究目的与意义
甲硫氨酸又名蛋氨酸,甲硫氨酸是构成人体的必需氨基酸之一,参与蛋白质合成。因其不能在体内自身生成,所以必须由外部获得。
如果甲硫氨酸缺乏就会导致体内蛋白质合成受阻,造成机体损害。
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本文主要研究如何通过加强芽孢杆菌中meti基因表达从而加强蛋氨酸的产量。由于微生物的长期自我调节,微生物自身能经济合理的利用并且合成体内所需的物质,导致野生菌中蛋氨酸的产量不会很高。
在蛋氨酸发酵过程中,为了提高蛋氨酸的产量,除了通过诱变的方式外,还可以通过基因工程的方式改变代谢途径。
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1)设计meti基因的引物:利用网络www.genome.jp/kegg/(全基因组及代谢途径数据库)与www.ncbi.nlm.nih.gov(生物技术信息数据库)找到几种芽孢杆菌的meti基因;
2)提取菌株的总dna,利用液氮与dna提取试剂盒提取;
3)利用引物提取本菌株的meti基因,电泳确认,送到生工测序;
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1、 孙文龙, 陆信曜, 宗红,等. 代谢工程改造大肠杆菌合成d-1,2,4-丁三醇[j]. 微生物学通报, 2014, 41(10):1948-1954.
2、 曹杰. 枯草芽孢杆菌ldh基因的敲除及丙氨酸生产[d]. 安徽大学, 2013.
3、 郭青云. 苏云金芽孢杆菌杀虫晶体的遗传改良及plcr基因功能研究[d]. 中国科学院武汉病毒研究所, 2006.
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2022-2022-1学期第17-20周-2022-2022-2学期第1周(2022.11.25-2022.03.11)利用网络资源设计meti基因的pcr引物;完成翻译;
第2-3周(2022.03.12-2022.03.25)提取芽孢杆菌的基因组;
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